文档介绍：小麦叶片生理指标测定一、种子处理: 1、 % ***化***浸泡小麦种子 30 分钟, 进行消毒, 小麦种子放在较大的培养皿中 2、将***化***倒入废液瓶,注意必须戴两层手套,因为***化***剧毒, 且用完的手套不能碰实验室里其它的任何东西, 以防污染, 最好把用完的手套放到 DNA 显色室中的废手套收集桶里; 3、然后用无菌蒸馏水冲洗 3 遍以上 4、最后用倒入适量无菌水( 稍微让水浸没种子表面) 进行种子萌发, 每天换次新水。二、小麦培养 1、在种子发芽以后, 在芽长 1cm 左右的时候, 将种子放入用网缝好的塑料泡沫上,然后放入装有自来水的培养盒中 2、大概三天左右的时间,将水倒掉,换上 1/2 hoagland 营养液(配方见下面的附件) ,每三天换一次营养液。三、小麦处理及指标测定 1、小麦培养两周后,在两叶一心期,用适当 PEG6000 浓度的 1/2hoagland 营养液换掉原营养液,各设一个对照(即没加 PEG600 0 的 1/2hoagland 营养液) 2、每隔 24h 取一次样,在 72h 后复水(即将 PEG6000 溶液倒掉,换成新配的 1/2hoagland 营养液) 四、生理指标测定 1、相对含水量测定⒈鲜重测定迅速剪取植物材料,装入已知重量的容器(或塑料袋)中,带入室内,用分析天平称取鲜重( FW )。⒉饱和鲜重测定将称过鲜重的植物材料浸入水中,数小时后取出,用吸水纸吸干表面水分,立即称重; 再次将材料放入水中浸泡一段时间后,再次取出,吸干表面水分,称鲜重,直到两次称重的结果基本相等, 最后的结果即为饱和鲜重( SFW )。若事先已知达到水分饱和所用的时间,则可一次取得饱和鲜重的测量定值。⒊干重测定提前把烘箱打开,温度升至 120 ℃。把称过鲜重的植物材料装入纸袋中,放入烘箱内, 120 ℃杀青 10min ,然后把烘箱的温度降到 70℃左右,烘至恒重。取出纸袋和材料,放入干燥器中冷却至室温,称干重( DW )。⒋取得以上数据后,按公式相对含水量。相对含水量=FW-DW/SFW-DW 2、 MDA 含量测定一、目的通过实验,掌握植物体内丙二醛含量测定的原理及方法。二、原理丙二醛( MDA )是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害,其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量, 通常利用硫代巴比妥酸(TBA) 在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应,生成红棕色的三甲川( 3、5、5 -三***恶唑 2、4 -二***),三甲川最大的吸收波长在 532nm 。但是测定植物组织中 MDA 时受多种物质的干扰, 其中最主要的是可溶性糖, 糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最大吸收波长在 450nm 处,在 532nm 处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加, 因此测定植物组织中丙二醛与硫代巴比妥酸反应产物含量时一定要排除可溶性糖的干扰。此外在 532nm 波长处尚有非特异的背景吸收的影响也要加以排除。低浓度的铁离子能显著增加硫代巴比妥酸与蔗糖或丙二醛显色反应物在 532 、 450nm 处的吸光度值, 所以在蔗糖、丙二醛与硫代巴比妥酸显色反应中需要有一定的铁离子, 通常植物组织中铁离子的含量为 100 - 300 μg·g -1 Dw ,根据植物样品量和提取液