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同型半胱氨酸测定检测操作程序.doc

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概述
血清同型半胱氨酸(Hcy)是人体内含硫氨基酸的一个重要的代谢中间产物,可能是动脉粥样硬化等心血管疾病发病的一个独立危险因子。Hcy水平升高被认为是动脉粥样硬化性疾病独立的渐进性致病因素,血浆中同型半胱氨酸含量与遗传因素、营养因素、雌激素水平、年龄因素等有关,同型半胱氨酸又称为高半胱氨酸,Hcy的正常参考值随测定方法和种族人群的不同而有所不同,一般正常空腹血浆总Hcy水平为5-15μmol/L。研究表明:Hcy每升高5umol/L脑卒中风险升高59%,缺血性心脏病风险升高32%;Hcy每降低5umol/L脑卒中风险降低24%,缺血性心脏病风险降低16%.Hcy水平与心血管事件风险呈正相关。
1 目的
规范血清同型半胱氨酸检测测试,确保检测结果准确性和重复性。
2 检测方法和原理
:速率法
:本产品基于一种新型酶法,样本中的氧化型Hcy被转化为游离型Hcy后,进行一系列循环反应,这种基于共价 底物转化产物的酶循环反应系统大大提高了检测的灵敏度,主要是利用S-腺苷同型半胱氣酸(SAH)水解酶反应原理, 在该反应中SAH被水解酶水解成腺苷和Hcy,腺苷立即水 解成氨和次黄嘌呤,氨在谷氨酸脱氢酶的作用下,NADH 转化为NAD,样本中Hcy浓度与NADH转化速率成正比。
3 标本采集与保护
新鲜无溶血血清或EDTA、肝素抗凝血浆
遵守以下推荐的血清标本处理,运行和储存步骤



,并及时测定
,将标本保存在4℃或更低温度的环境中:




,严重溶血和乳糜血标本与临床沟通并将标本退回,填写不合格标本拒接登记。
4 试剂和设备

采用深圳奥萨制药有限公司试剂

试剂1 S-腺苷甲硫氨酸(SAM) 0. 1 mM
烟酸***腺嘌呤二核苷酸(NADH) 0. 3 mM
三(2-羧乙基)膦***化氢(TCEP) 0. 5 mM
α—***戊二酸(Oxoglutarate) 5. 0 mM
Hcy***转移酶(HMTase) KU/L
试剂2 谷氨酸脱氢酶(GLDH) KU/L
S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)水解酶(SAHase) KU/L
腺苷脱氨酶(ADA) KU/L
;恢复室温后使用
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试剂2~8℃避光保存

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