文档介绍：大鼠促黄体激素（LH）ELISA试剂盒使用建议
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 48T
ng/L - 40 ng/L 使用目的：
本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中促黄体激素（LH）含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠促黄体激素（LH）水平。用纯化的大鼠促黄体
激素（LH）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入促黄体激素（LH）,
再与HRP标记的促黄体激素（LH）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的促黄体激素（LH）呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定
吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠促黄体激素（LH）浓度。
试剂盒组成
1
20倍浓缩洗涤液
20ml X 1 瓶
7
终止液
3ml x 1 瓶
2
酶标试剂
3ml x 1 瓶
8
标准品(80ng/L)
X 1 瓶
3
酶标包被板
12孔X 4条
9
标准品稀释液
X 1 瓶
4
样品稀释液
3ml x 1 瓶
10
说明书
1份
5
显色剂A液
3ml x 1 瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂B液
3ml x 1/瓶
12
密封袋
1个
标本要求
.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上
进行试验，可将标本放于 -20 C保存，但应避免反复冻融
.不能检测含 NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
40ng/L
5号标准品
150 d
的原倍标准品加入150 M标准品稀释液
20ng/L
4号标准品
150 d
的5号标准品加入150 M标准品稀释液
10ng/L
3号标准品
150 d
的4号标准品加入150 M标准品稀释液
5ng/L
2号标准品
150 d
的3号标准品加入150 M标准品稀释液

1号标准品
150 d
的2号标准品加入150 M标准品稀释液
.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50小待测样品孔中先加样品稀释液 40 M,
然后再加待测样品10 d （样品最终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
.温育:用封板膜封板后置 37 c温育30分钟。
.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸储水 20倍稀释后备用
.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
.加酶：每孔加入酶标试剂 50 口，空白孔除外。
.温育:操作同3。
.洗涤：操作同5。
. 显色：每孔先加入显色剂 A50U,再加入显色剂 B50M,轻轻震荡混匀，37c避光显色 15分钟.
.终止：每孔加终止液 50人终止反应（此时蓝色立转黄色）。
.测定：