文档介绍:生化分析常用技术
光谱分析:
紫外-可见光吸收光谱:生化分析仪
分子发光光谱、
原子吸收光谱
层析技术:HPLC
免疫技术
蛋白电泳技术
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自动生化分析仪
自动生化分析仪是集自动化技术、光学、微电子技术学和计算机科学与临床生化分析的进样、稀释、混合、反应、比色、分析过程的监控和数据记录、计算、打印功能于一身的自动化仪器,这种仪器设备具备有信息反馈、完成自我监控、自我调节等功能
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朗伯-比尔定律
分光光度法是基于不同分子结构的物质对电磁辐射的选择性吸收而建立起来的方法,属于分子吸收光谱分析。当光通过溶液时,被测物质分子吸收某一波长的单色光,被吸收的光强度与光通过的距离成正比。虽然现在了解到Bouguer早在1729年已提出上述关系的数学表达式,但通常认为Lambert 于1760年最早发现表达式,其数学形式为:
T=I/I 0 =e -kb
其中I 0为入射光强,I为透射光强,e为自然对数的底, k为常数, b为光程长度(通常以cm 表示) 。
比尔定律等同于Bouguer 定律,只是比尔定律以浓度来表达。将两个定律结合起来,组成Beer-Bouguer定律:
T=I/I 0 =e -kbc
其中c为吸光物质的浓度(通常以g/L 或mg/L 为单位)。将上式取以10为底的对数后,得到线性表达式:
A=-logT=-log(I/I 0 )=log(I 0 /I)=εbc
其中A 为吸光度,ε是摩尔吸收光系数或消光系数。
上述表达式通常称为比尔定律。它表明,当特定波长的单色光通过溶液时,样品的吸光度与溶液中吸收物浓度和光通过的距离成正比。
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主要内容
基本结构及工作原理
发展趋势
主流品牌生化仪简介
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基本结构及工作原理
分 类 1
流动式
分立式
袋式
干化学式
分 类 2
连续流动式
分立式
离心式
模块式
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连续流动式(Continuous flow)
世界第一台
美国Technicon公司
1957年
Auto analyzer
采用“气泡隔离连续分析”原理
由半自动生化分析仪发展而来
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管道式分析仪
管道式分析仪的特点是测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的化学反应,是在同一管道中经流动过程完成的。这类仪器一般可分为空气分段系统式和非分段系统式。所谓空气分段系统是指在吸入管道的每一个样品、试剂以及混合后的反应液之间,均由一小段空气间隔开;而非分段系统是靠试剂空白或缓冲液来间隔每个样品的反应液。在管道式分析仪中,以空气分段系统式最多,且较典型,整套仪器是由样品盘、比例泵、混合管、透析器、恒温器、比色计和记录器几个部件所组成(下图)。管道内的圆圈表示气泡,气泡可将样品及试剂分隔为许多液柱,并起一定的搅拌作用,但气泡影响比色,必须在比色前除去。
将几个单通道管道式分析仪结合起来,对一个样品同时测定几个项目。著名的有 12 通道分析仪,命名为顺序多项自动分析仪( sequential multiple autoanalyzer ),简称 SMA12/60 。同时发展为 SMAC , C 为计算机( computer )的缩写。这类大型分析仪至今仍有使用者。它对每个样品可同时分析 12 个项目,每小时可分析 60 个样品。后来发现不加入空气泡,更有利于结果的检测,发展为流动注射分析法( flow injection analysis )。试剂的流动仍用比例泵驱动,样品用转动阀加入液流,反应后比色检测。
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管道式生化仪结构示意图
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连续流动式(Continuous flow)
管道系统结构复杂
不能克服交叉感染
故障率高
操作繁琐
20世纪80年代已淘汰
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离心式生化分析仪(Discrete Analyzer)
1968年美国Qakridye国立实验室的Norman Anderson创立了离心式自动生化分析仪,因分析全过程在离心条件下完成而得名。它的特点是试剂和样品在离心力作用下完成混合、反应、测定的过程。圆盘上有呈放射状的三个一组的组孔,可多达30组。里边的一个孔中加试剂,中间的孔加样品,最外边孔的上下表面用透明塑料制成,孔壁的靠上部分有孔和中间孔相通,这