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温对酶活性的影响学习教案.ppt

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温对酶活性的影响学习教案.ppt

上传人:wz_198613 2021/12/29 文件大小:369 KB

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文档介绍

文档介绍:会计学
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温对酶活性的影响(yǐngxiǎng)
第一页,共11页。
一、实验(shíyàn)原理
升高温度能使一切化学反应加速进行,对酶的催化反应也不例外。
在低温时,酶的催化反应速度一般很低;温度升高,催化反应速度也随之升高,但酶是蛋白质,升高温度引起蛋白变性,使酶的活性降低。
所以(suǒyǐ)温度对酶的活性有两种相反的影响,一方面遵从温度升高可加速化学反应的普遍规律,一方面又随着温度的升高而使酶蛋白变性的程度逐渐加大,前者使酶的活性增加,后者可使酶的活性降低甚至丧失。
第1页/共10页
第二页,共11页。
一般在比较低温的范围内(例如0~40℃),温度对酶蛋白变性(biànxìng)的影响不大,故酶的活性随温度的上升而增加,若超过此温度范围,则由于酶蛋白加速变性(biànxìng),可使酶的活性急剧下降甚至完全不可逆的丧失其活性(见图)。因此,每种酶都有它的最适温度(optimum temperature),在这个温度下,酶表现出最高的活力。
植物或微生物体内存在(cúnzài)的酶,其最适温度在50℃左右,如温度高至80℃时,除极少数酶外,酶的活性几乎完全丧失。
第2页/共10页
第三页,共11页。
脲酶(urease )的最适温度约在45℃左右,此时很容易将尿素分解成氨,后者能与奈氏(Nessler)试剂作用生成橙黄色物质。生成的氨愈多,颜色亦愈深,表示酶的活性愈大。由颜色深浅,可判断反应(fǎnyìng)进行的程度。
C=O + H2O → 2NH3 + CO2
NH2
NH2
脲酶
NH3 + 2() + NaOH →O< >NH2 I+ 4KI + 2H2O + 3NaI
Hg
Hg
奈氏试剂
碘化双***铵(橙黄色)
第3页/共10页
第四页,共11页。
二、实验(shíyàn)用品
1、材料
脲酶提取液:取黄豆粉6克,加30%乙醇250毫升,振荡10分钟,过滤,可保存1-2星期。
2、试剂
(1)
(2)%尿素液
(3)奈斯勒(Nessler)试剂:称取5克碘化钾,溶于5毫升蒸馏水中,加入饱和***化***溶液(***化***),并不断搅拌。直至产生(chǎnshēng)的朱红沉淀不再溶解时,再加40毫升50%氢氧化钠溶液,稀释至100毫升,混匀,静置过夜,倾出清液存于棕色瓶中。
3、仪器设备
小试管及试管架、滴管、水浴、温度计
第4页/共10页
第五页,共11页。
三、方法(fāngfǎ)和步骤
1、取小试管3支,编号,按下表加入(jiārù)各种试剂并将各管在指定的温度下预先保温5分钟。
第5页/共10页
第六页,共11页。
试剂
管号
%尿素液

温度
1
5滴
5滴
0~5℃(水浴)
2
5滴
5滴
40~50℃(水浴)
3
5滴
5滴
90~100℃(水浴)
(wēndù)对脲酶活性的影响
第6页/共10页
第七页,共11页。
2、每管各加入脲酶1滴,立即混匀并继续在各指定温度下保温(bǎowēn)10分钟,然后将第2管及第3管用流动的自来水冷却至室温,再放入冰水中泠却。
3、于上述3管内,各加钠氏试剂2滴,混匀后,观察各管颜色的深浅。
第7页/共10页
第八页,共11页。
四、实验(shíyàn)结果
指出哪一温度对酶的活性最适合。
注意事项
奈斯勒试剂是含有大量***盐的强碱性溶液,所以,它是具有腐蚀的剧毒试剂。实验时必须严格遵守操作规程,谨防中毒。此外,作酶学实验时所用的玻璃仪器等一切器皿必须洁净,以除去能抑制酶活性的杂质。因此,用奈斯勒试剂作完实验后,必须将它所沾污的试管等一切器皿充分(chōngfèn)洗涤干净。
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第九页,共11页。
五、思考题

(cèdìng)一个酶的最适温度?它是否是酶的特征性常数?
?
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第十页,共11页。