文档介绍：会计学
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微生物革兰氏染色法和芽孢(yá bāo)染色法
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革兰氏染色法
实验目的
学****并掌握革兰氏染色方法；了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。
实验原理
革兰氏染色法是细菌细胞的复合染色法，由丹麦(dān mài)病理学家Hans Christian Gram 于1884年创立。该法是细菌学中最重要的鉴别染色法。
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第一步：初染:结晶紫使菌体着上蓝紫色；第二步：媒染:碘和结晶紫形成大分子复合物，能被细胞壁阻留在细胞内；第三步：酒精脱色(tuō sè):细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应——G+菌：细胞不能被酒精脱色(tuō sè)，仍呈紫蓝色；G-菌：酒精将细胞脱色(tuō sè)，细胞无色；第四步:番红复染， G-菌呈红色， G+菌呈紫蓝色。
革兰氏染色(rǎnsè)原理
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实验器材
1）菌种：大肠杆菌和枯草芽孢杆菌
2）染色剂：结晶(jiéjīng)紫，番红
3）器材：显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、双层瓶、擦镜纸等
革兰氏染色法
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实验(shíyàn)步骤
混合(hùnhé)涂片法涂片、干燥、固定结晶紫初染1min，水洗碘液媒染1min，水洗用滤纸吸去残水后，将玻片倾斜，在白色背景下，用95%乙醇脱色，直至流出的乙醇无色时，立即水洗番红复染2min，水洗干燥后，镜检
注：乙醇脱色(tuō sè)是革兰氏染色操作的关键环节，脱色(tuō sè)不足，阴性菌被染成阳性菌；脱色(tuō sè)过度，阳性菌被染成阴性菌
革兰氏染色法
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实验(shíyàn)结果
阳性菌（蓝紫色）
阴性菌（红色(hóngsè)）
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细菌(xìjūn)芽孢染色法
实验(shíyàn)目的
学****并掌握芽孢染色方法；初步了解芽孢杆菌的形态特征。
实验(shíyàn)原理
芽孢：某些细菌在一定的环境条件下，能在菌体内部形成一个圆形或卵圆形小体，是细菌的休眠形式。产生芽孢的都是革兰氏阳性菌。
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芽孢(yá bāo)染色法原理
用弱碱性染料孔雀绿在加热条件下染色，使染料不仅进入(jìnrù)菌体，也可进入(jìnrù)芽孢内。进入(jìnrù)菌体的染料经水洗后被脱色，而芽孢一经着色后难以被水洗脱，当用对比度大的复染剂染色后，芽孢仍保留初染剂的颜色，而菌体被染成复染剂的颜色，使芽孢和菌体易于区分。
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实验器材
1）菌种：枯草芽孢杆菌
2）染色剂：5%孔雀绿水溶液、%番红水溶液
3）器材：显微镜、滴管(dī ɡuǎn)、酒精灯、载玻片、接种环等
细菌(xìjūn)芽孢染色法
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实验(shíyàn)步骤
1）改良的Schaeffer-Fulton氏染色法
制备菌悬液孔雀绿染液(2滴)水浴加热染色15-20 min 取1小滴，涂片，固定(gùdìng) 水洗番红染液复染2-3min，倾去染液，水洗镜检
2）Schaeffer-Fulton氏染色法
涂片固定(gùdìng) 孔雀绿染液在微火上加热染色5min 水洗番红染液复染2min 水洗镜检
细菌(xìjūn)芽孢染色法
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