文档介绍：实验五微生物细胞大小和数量的测定微生物细胞大小和数量的测定§目的要求§实验材料§实验程序§思考题目的要求§学****使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。§学****使用血球记数板测定微生物数量的方法。实验材料§显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、细菌染色片、血球记数板、酵母菌悬液、盖玻片、无菌滴管、西水纸、擦镜纸、香柏油、二甲苯。实验程序§测定微生物的大小§测定微生物数量实验程序Ⅰ(测定微生物的大小) §测定的工具:目镜测微尺镜台测微尺实验程序Ⅱ(测定微生物的大小) §目镜测微尺的校正:在高倍镜下,看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器,使目镜测微尺的 0点与镜台测微尺的某一刻度重合,然后,仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计算两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。由于镜台测微尺的刻度每格长 10μm,所以可得: 目镜测微尺每格长度( μm)=(镜台测微尺格数×10)/目镜测微尺格数注意:校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的接物镜、接目镜、镜筒长度等)进行,而且只能在这特定的情况下才可重复使用。§菌体大小的测定:取下镜台测微尺,将细菌染色标本置于载物台上,然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的长和宽。实验程序Ⅲ(测定微生物数量) §方法:活菌计数法——平板菌落计数法;总菌计数法——血球计数板或霍瑟( Peroff Hausser )细菌计数板(二者原理和部件相同,只是厚薄不同而已)。实验程序Ⅳ 1 (测定微生物数量) §本实验用血球计数板计数酵母菌的数量 ,在计数室上面加盖玻片。 2. 取酵母菌液,摇匀,用滴管由盖玻片边缘滴一小滴,使菌液自行渗入,计数室内不得有气泡。 3. 静止 5 min 后,用低倍镜观察并将计数室移至视野中央。 :随机计数五个中格的平均值,然后求得每个中格的平均值。乘上 16(或 25) 就得出一大格中的总菌数,最后再换算到每 mL 菌液中的含菌数。实验程序 IV 2 5. 计算方法: 6. 注意事项:压在方格线上的菌体,以压在底线和右侧线上的菌体计入本格内;遇到有芽体的酵母时, 若芽体和母体同等大,就按单个酵母计数。 ,血球计数板要立即清洗干净,并用吸水纸吸干,最后用擦镜纸擦干净,并放回盒内。( X1+X2+X3+X4+X5 ) 5 X 25 (或16) X 10 X 1000 x 稀释倍数酵母菌细胞数/ mL =