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⋯“蕊磊暹谖逋蚧尕品面诼鬲面瓦丽面面面■面面磊蕊？骾蔚赢酵母卢一葡聚糖水解酶的表达及应用二二二二二二ザ二二二ザ三二二袷称哇物技术学报年第卷第谙加糩至二二康振堵国成，籊周星王丽性。以大肠杆菌为宿主，异源表达声一一葡聚糖水解酶蚿一一葡聚糖水解酶母葡聚糖的质量浓度为．眩琖堋拢琄眔摘要：酵母口一葡聚糖是一种具有多种生物功能的细胞壁结构多糖，但天然的酵母黄暇厶撬溶性较差，影响了其在医疗、保健食品和化妆品行业中的应用。作者通过口一一葡聚糖水解酶涂谝，黄暇厶撬饷窧饨湍附煲黄暇厶侵票感》肿咏湍钙暇厶牵岣咂渌。在℃条件下，添加诱导后，虰淖罡呙富罘直鹞痬痬＝湍附煲黄暇厶蔷鼼和水解后，溶解率分别提高了倍和倍。采用虰餐猓湍钙粢黄暇厶侨芙饴侍岣吡．水溶性酵疞Ｒ虼耍珿和在提高酵母葡聚糖的水溶性和制备小分子酵母葡聚糖领域具有重要的应用价值。关键词：酵母；口一葡聚糖；水解酶；水溶性；小分子黄暇厶中图分类号：文章编号：—一一痡．．。．．．悖瑆籫叩卢一话賣一一—话賣卢一喀，籫西Ｊヽ矨出籅—．江南大学生物工程学院，江苏无锡；洗笱腔в肷锛际踅逃恐氐闶笛槭遥瘴尬，健，．瑃琱够野／赥痬瑀粢籫卜疞．珿‘／，琈．．．，痭甌哆—仃．基金项目：国家自然基金面上项目；江南大学自主科研计划重点项目还仪峁ぜ际跤牍こ桃涣餮Э谱灾骺。通信作者：康振，男，博士，教授，硕士研究生导师，主要从事多糖的生物合成及应用方面的研究。猰簔癵卿甧．，，．缸琂收稿日期：一—题。
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【】。丛从冢畇Ｙ叫珩粢杂砌基因蚴章己牛篈赡暇┙鹚连桓髦窒拗菩阅谇忻福汗鹤訲珊。公司：：籫琱，卜瑂届一酵母口一葡聚糖是存在于酵母细胞壁中的一种多糖，占细胞壁干质量的％～％【俊＝湍缚谝黄暇糖是以口一一葡聚糖为主，届一一葡聚糖为辅的一种混合多糖，其中％左右为水不溶性。研究表明，酵母口一葡聚糖是一种良好的生物效应应答剂，具有增强免疫力、激活免疫细胞、抗肿瘤、抗感染等功能【。此外，酵母届一葡聚糖还可以抗氧化、抗辐射、降低胆固醇和血脂。因此。酵母口一葡聚糖已广泛应用于医疗、保健食品和化妆品行业中【蚓。酵母口一葡聚糖通过分子间氢键的相互作用，形成致密的三股螺旋结构而不溶于水，水不溶性不仅制约了酵母口一葡聚糖的应用范围，也会影响其生物活性的发挥【ＮA颂岣呓湍缚谝黄暇厶堑乃苄裕内外学者对其进行了修饰和改性研究。主要方法有化学方法、物理方法和生物方法。物理方法主要有超声波法门、辐照法【亢突祷罨ā换Х椒ㄓ恤甲基化【⒘蛩狨セ痆土姿狨セ；生物方法主要是酶法。酶法增溶改性是通过口一葡聚糖酶将大分子酵母口一葡聚糖酶解成小分子葡聚糖，从而增加酵母口一葡聚糖的水溶性，水解过程条件温和，不会破坏酵母届一葡聚糖的结构，对其生物活性影响较小。目前，用于生物法对酵母葡聚糖改性增溶的酶种类少，价格昂贵【】。本研究中，作者在大肠杆菌中异源表达两种不同的酵母届一葡聚糖水解酶，分别是口一一葡聚糖水解酶“亢涂谝，黄暇厶撬饷，对于口一一葡聚糖具有内切水解作用。来源于启∞把鐂俜磑￡∞，对口一一葡聚糖具有内切水解作用。通过两种不同的酵母口一葡聚糖的水解作用，可以降低酵母口一葡聚糖的相对分子质量，增加其在水中的溶解率。¨．荫株和质粒甤大肠杆菌：用于构建和增殖重组质粒，作者所在实验室保存：甤大肠杆菌罕泶锼拗鳎髡咚谑笛槭保存；质粒，启动子鹤髡咚在实验室保存。酆厦浮用和大肠杆菌感受态细胞制