实验四 大肠杆菌发酵培养基的优化.ppt

文档介绍：实验四 大肠杆菌发酵培养基的优化
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实验目的



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实验原理

3
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
3
1
2
2
3
1
X1
X2
X3
X4
X5
X6
X7
X8
X9
（4）分析试验结果
1）方法一：直接比较
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直观分析法是通过对每一因素的平均极差来分析问题。
所谓极差就是平均效果中最大值和最小值的差。有了极差，就可以找到影响指标的主要因素，并可以帮助我们找到最佳因素水平组合。
极差的大小反应在所选择的因素水平范围内该因素对测定结果影响的程度。极差大的因素在所选择的因素水平范围内对测定结果的影响最大，在测试过程中必须严格控制。
2）方法二 直观分析
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因素
实验号
A
B
C
结果
1
2
3
4
5
6
7
8
9
1
1
1
2
2
2
3
3
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
3
1
2
2
3
1
X1
X2
X3
X4
X5
X6
X7
X8
X9
k1
k2
k3
(X1+X2+X3)/3 (X4+X5+X6)/3 (X7+X8+X9)/3
(X1+X4+X7)/3 (X2+X5+X8)/3 (X3+X6+X9)/3
(X1+X5+X9)/3
(X2+X6+X7)/3 (X3+X4+X8)/3
极差
K最大- K最小
K最大- K最小
K最大- K最小
A： 首先计算各因素每个水平的平均效果和极差。
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B ：然后对计算结果进行分析，分析各因素的主次和影响趋势，找到最优试验方案。
比较RA 、RB、RC值，R值越大的因素，影响越大，控制要越严格，R值越小的因素，影响越小。
对每一个因素，选择K值最大的水平为最佳条件。如对于因素A 淀粉，若k2>K1>k3 ，即k2最大，根据因素水平表中的设计，其水平为7%。表明7%为最佳的淀粉浓度。对于因素B ，k2最大，对于因素C ，k3最大。
则实验的最佳实验条件为： A2 B2 C3，即最佳实验条件为：淀粉为7%，黄豆饼粉5%，%
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若某一因素k3或者k1 最大，则说明所选择的该因素的水平范围不合适， 如：对于因素C，k3最大，% 不一定为最佳。如果该因素的R值较大，影响较显著，则必须进行重复实验或对照实验。
其中对照实验条件应为：
试验1： A2 B2 C3
试验2： A2 B2 C4
C4应大于C3
对照两者的结果，若试验1结果值大于试验2，则试验1条件即为最优化条件。若试验2结果值大于试验1，则应再改变因素C的水平，继续做对照实验，直至达最佳结果。
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细菌培养物在生长过程中，由于原生质含量的增加，会引起培养物混浊度的增高。细菌悬液的混浊度和透光度成反比、与光密度成正比，透光度或光密度可借助光电比浊计精确测出，因此可用光电比浊计测定细胞悬液的光密度（OD值），表示该菌在特定实验条件下的细菌相对数目，进而反映出其相对生长量。
四、比浊法测定发酵液菌浓
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本实验以菌体生物量为指标，用四因素三水平的正交试验确定大肠杆菌的最优培养基。
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实验步骤
一、培养基的配制
表1 正交试验表设计
因素水平
A酵母浸膏/%
B蛋白胨/%
C***化钠/%
D pH
1



6
2

1
1
7
3



8
、蛋白胨、***化钠作为培养基的主要影响因素，每一因素设定3个水平，进行三因素三水平的正交试验，试验设计如表1
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因素
A酵母浸膏/%
B蛋白胨/%
C***化钠/%
D pH
OD值
实验1
1()
1()
1()
1(6)
实验2
1()
2(1)
2()
2(7)
实验3
1()
3()
3()
3(8)
实验4
2()
1()
2()
3(8)
实验5
2(