文档介绍：紫外可见分光光度计
主要内容
1、工作原理及仪器组成
2 、分光光度计的使用
波长扫描
定量测定
3 、注意事项
互
补
色
原
理
植物叶子呈现绿色是因为植物中存在一种吸收蓝紫光和红光的载体——叶绿素
颜色的产生le-pitch aberration-corrected diffraction grating
旋转镜将光分成两束，分别通过参比池和样品池，然后聚集在PMT
开始
程序启动
按
方法设定
按钮
扫描范围
读数方式
扫描速度
按
样品名输入
按钮
或
将空白样品分别放入参比池和样品池
进行用户基线校正
按
按钮
将样品放入样品池
开始测量
按
按钮
开始测量
打印数据
按
按钮
打开数据处理界面
数据检索
峰值检出
图谱平滑、求导
二 分光光度计的使用-波长扫描
启动UV Solution软件
打开仪器主机电源。用鼠标点击Windows开始菜单中的[Hitachi Applications]选项中的[UV Solutions ] 选项。或者直接在桌面上双击UV Solution图标。
2 运行UV Solution软件。软件将自动配置计算机的串行口（RS 232 Port）见图
仪器在初始化过程中进行如下自检工作：
ROM检测
RAM检测
波长步进电机运转检测
氘灯点亮检测
钨灯点亮检测
仪器波长校正
3 仪器主机开始初始化。见图
4 仪器主机初始化完毕，进入工作状态。
5 测量参数设置
1 在[Edit]菜单中选择[Method…]选项，或按按钮。出现下列窗口。
General:总体设置页面
Measurement测量:
Wavelength scan 波长扫描
Time scan 时间扫描
Photometry 定波长测量
Operator操作者: 输入操作者的姓名
Instrument仪器:仪器型号由软件自动从仪器主机获得。
Use Sample Table使用样品表:选择是否使用样品表。
Comments备注:填写一些备注信息。
[Load]按钮:用于装载原来保存的方法文件。
[Save]按钮:保存当前的设置参数。
[Save As]按钮:将当前设置参数另存为一个方法文件。
Instrument仪器参数设置页面
Data mode读数显示方式，选择Abs吸光度，波长扫描的起止范围一般为190-800，狭缝值一般为2
Light一般选择“Auto”
Monitor显示页面
Processing数据处理页面
Report报告结果页面
样品名设置，备注信息及文件名输入
基线校正
用户基线校正方法：可将scan speed 设小一些；进行样品扫描时，可设大一些。 将空白样品分别放入样品室的参比光路和样品光路。按按钮
系统基线校正方法。
使用空气作为参比和样品。按按钮 出对话框见图，选择System后按[OK]按钮，进行系统基线校正。
测 量
有两种方法可以开始测量：
使用菜单方式
选择[Spectrophotometer]菜单下Start]选项开始测量
使用按钮方式 ：按按钮 开始测量
如果要终止扫描按按钮 。
开始
程序启动
按
方法设定
按钮
按
样品名输入
按钮
或
将空白样品分别放入参比池和样品池
将样品放入样品池
开始测量
按
按钮
开始测量
打印数据
按
按钮
打开数据处理界面
进行用户基线校正
按
按钮
定量测量
设置波长
输入标样
二 分光光度计的使用-光度法
测量参数设置
在[Edit]菜单中选择[Method…]选项。出现下列设置窗口.
具体操作程序
Method:
general: Measurement测量方式选择Photometry（光度计测量）
Quantitation定量参数设置页面：
在measure中选择波长wavelength，在Calibration中选择“1st order”， “2st order”， “3st order”，也可以不校准。在concertration中键入标准浓度单位。
3. Instrument
4 standards标准参数设置
键入标系的样品浓度及名称
5 吸光度自动校零
在开始测试前，需要进行吸光度校零。在样品室参比和样品光路中分别放入空白样品。按按钮 进行吸光度校零。
6 在wavelength中设定扫描的最大吸收波长，
7 放入标样，选中第一个标样，点measure依次测定完成