文档介绍：*
掌握酶的催化活性，酶的高效性和特异性
了解各种因素（如温度、pH及一些化学物质）对酶活性的影响
唾液淀粉酶的制备和活性观察
一、实验目的
第一页，共14页。
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二、实验原理
酶是生物体内具有催化功能的生物大分子，也叫生*
掌握酶的催化活性，酶的高效性和特异性
了解各种因素（如温度、pH及一些化学物质）对酶活性的影响
唾液淀粉酶的制备和活性观察
一、实验目的
第一页，共14页。
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二、实验原理
酶是生物体内具有催化功能的生物大分子，也叫生物催化剂。
酶活性: 酶的催化能力,用催化化学反应的速度表示
酶活性的测定方法：1）定底物
2）定时间
影响酶活性的因素是多方面的，如温度、pH, 激活剂和抑制剂 等都会影响酶的催化活性。
第二页，共14页。
二、实验原理
pH值的影响: 能使酶活性达到最高时的pH值，称为该酶的最适pH。
温度的影响: 在一定温度范围内，随着温度的升高，酶促反应速度增加，直至达到最大值。在一定条件下，能使酶活性达到最高的温度即酶的最适温度。
激活剂和抑制剂的影响: 能增高酶活性的物质即称为酶的激活剂，能降低酶活性却又不使酶变性的物质叫酶的抑制剂。
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第三页，共14页。
本实验以淀粉为底物, 淀粉酶作用下得到各种糊精乃至麦芽糖、少量葡萄糖等水解产物。用碘液检查酶促淀粉的水解程度，来说明温度、pH及化学物质对酶活力的影响。
淀粉酶 淀粉酶
淀粉——————→糊精—————→ 麦芽糖+少量葡萄糖
加碘后；（兰色） （紫红色、暗褐色或红色等） （棕黄色，碘本身颜色）
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二、实验原理
第四页，共14页。
影响酶活性的因素
1）温度 2）pH 3）激活剂和抑制剂
酶的特性（专一性）
还原糖和斑氏（Benedict）试剂的反应原理
C6H12O6 + 2Cu(OH)2
+ Cu2O
+ 2H2O
OH-
加热
实验原理
第五页，共14页。
三、试剂及器材
1. 试剂
• （1）% (w/v) 淀粉溶液
• （2）稀碘溶液
• （3）不同pH缓冲液 ( 、、)
• （4）1% (w/v) NaCl溶液
• （5）1% (w/v) CuSO4溶液
2. 器材
• 比色板、水浴锅、刻度吸管及滴管
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第六页，共14页。
四、操作步骤
1. 温度对酶活力的影响 取3支试管，编号后按下表操作:
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试管编号
1
2
3
% 淀粉
5
5
5
pH 缓冲液
反应条件
置冰水浴中
置37℃水浴中
置沸水浴中
稀释唾液
1
1
1
单位：mL
第七页，共14页。
在干净的比色板上，于各孔穴中分别滴加2滴碘液。
每隔1min从第2支试管中取反应液1滴，与比色板孔穴中的碘液混合，观察颜色的变化。
待第2支试管中的反应液与比色板孔穴中的碘液混合后颜色呈棕色时，取出试管，并将在沸水浴中处理的试管用冷水冷却，然后向各试管中滴加碘液1-3滴。
摇匀后观察并记录各管颜色，比较各管中淀粉水解的程度，说明温度对酶活性的影响。
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第八页，共14页。
2. pH值对酶活力的影响
取3支试管，按下表编号后进行实验。
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四、操作步骤
单位：mL
试剂
1
2
3
% 淀粉
2
2
2
pH 缓冲液
2
—
—
pH 缓冲液
—
2
—
pH 缓冲液
—
—
2
稀释唾液
1
1
1
第九页，共14页。
摇匀后，将各管置于37℃水浴中处理。
（1）每隔1min从的试管中取出1滴反应液滴于预先滴加稀碘液的白瓷板上，观察其颜色变化。
（2）待颜色呈棕色时，向各管中加稀碘液1-3滴。观察各管颜色，比较各管中淀粉水解的程度，解释pH对酶活性的影响。
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第十页，共14页。
3. 酶反应的特异性
取2支试管，按下表编号后进行实验。
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四、操作步骤
单位：mL
试剂
1
2
% 淀粉
2
—
% 蔗糖
—
2
稀释唾液
1
1
第十一页，共14页。
将各管摇匀后，一起放入37℃水浴中保温10min。
取出试管，分别加入斑氏试剂 1 mL，混匀。
将各管置于沸水浴中煮沸2-5 min。观察并解释结果。
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第十二页，共14页。
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