文档介绍：蛋白沉淀法与饮食文化
1）、豆腐的由来：“来其”、“黎其”，汉朝淮南王刘安
2）、一人得道，鸡犬升天
问题
问题：
A、1941-12-7, 7:59am
珍珠港事件 --- 烧伤 --- 蛋白流失，感染
B、 价格低廉；
最常用(NH4)2SO4。优点：符合上述要求；缺点：水解后溶液pH降低，在高 pH下产氨，腐蚀性强，有异味，有毒，终产物必须除尽。
次常用Na2SO4。缺点：在400C以下溶解度较低，主要用于热稳定蛋白。
5 盐析法
B、无机盐添加方式
5 盐析法
C、温度T
主要考虑不能影响主要产物的活力,即在其稳定的温度下盐析,可通过实验决定,一般来说,温度越低,形成沉淀越不易,,盐析的温度范围较大,所有一般都在常温下盐析.
5 盐析法
D、溶液pH
pH影响Cohnx方程中的值。
见图
图有何用？
6 等电点沉淀法
等电点沉淀法中的pH值作用于β值而隐含在Cohnx公式中，pI值通常在pH4~6范围内变化，一般用无机酸（如盐酸、磷酸和硫酸）作沉淀剂。
在蛋白质疏水性比较大和结合水比较小时这种类型的沉淀更有效。为了提高等电点法的沉淀能力，常将其与盐析法、有机溶剂法或其他沉淀法一起使用。
最大缺点：无机酸会引起较大的蛋白质不可逆变性的危险。
7 有机溶剂沉淀法
同盐析一样，随着沉淀剂——有机溶机浓度的上升，蛋白质溶解度也呈指数规律下降。
式中, So为当（K/e2） 0时S的外推值；e为水-有机溶剂混合物的介电常数；K为常数(水的介电常数的吸收系数)。
7 有机溶剂沉淀法
有机溶剂的种类：
***(首选)、乙醇、甲醇和乙***，常用于低盐浓度下沉淀pro。
机理：
A、有机溶剂沉淀法的机理是加入溶剂后，会使水溶液的介电常数降低，而使pro分子间的静电引力（库仑力）增大，导致凝集和沉淀。
B、有机溶剂使pro溶剂化，使原来与pro结合的水被溶剂所取代，从而降低了pro溶解度。这种理论不能说明为什么乙醇比***的亲水性强，***却比乙醇沉淀pro的能力强，也解释不了***、乙醇之类溶剂在所谓脱去pro水膜的过程中容易造成pro变性，而盐析脱水时不造成pro变性。
C、***、乙醇等不仅是pro的沉淀淀剂，而且还是一种变性剂，可见作用有机溶剂使pro在沉淀和变性之间既有区别又相关联。
7 有机溶剂沉淀法
影响因素及控制
A、T：当乙醇与水混合时，会放出大量的稀释热，使溶液T显著升高，对不耐热的pro影响较大。解决办法：搅拌、少量多次加入，以避免温度骤然升高损失pro活力。另一方面温度还会影响有机溶剂对pro的沉淀能力，一般温度越低，沉淀越完全，所以在乙醇沉淀人血浆蛋白时，温度控制在-10C下进行。
B、[乙醇]：通常随[乙醇]上升，pro溶解度下降。如血纤维蛋白原的最大溶解度在乙醇浓度为8%时达到最大，而当乙醇浓度为40%时达到最小。
C、pH值：在确定了[乙醇]以后，，因此可以通过调节pH值来选择性分离蛋白质。
D、[pro]：避免使用很稀的浓度，因pro在高浓度下才较稳定。
7 有机溶剂沉淀法
优点：
A、某些蛋白质沉淀的浓度范围相当宽，所得产品的纯度较高，
B、从沉淀的蛋白质中除去有机溶剂很方便，而且有机溶剂本身可部分地作为蛋白质的杀菌剂；
缺点：
A、耗用大量溶剂，而溶剂来源、贮存都比较困难麻烦；
B、且沉淀操作需在低温下进行，使用上有一定的局限性；
C、收率也比盐析法低；
D、试剂易燃，有毒。
8 非离子型聚合物沉淀法
某些聚合物，如聚乙二醇（PEG）、聚乙烯吡咯烷***（PVP）和葡聚糖等，具有沉淀蛋白质的作用。其中最常用的是PEG，相对分子质量从200D到20KD的不同聚合程度的产品都是有效的，通常在蛋白质沉淀中使用PEG-6000或PEG-4000。
计算公式：
式中，S-溶解度；c-PEG浓度；β-常数，受溶液条件的影响(如pH值和离子强度)；K-常数，由pro大小和PEG的类型决定。
适应条件：上式适用性广，但在低浓度蛋白质，，如75g/L和150g/L时，实验结果会偏离线性。这时方程需校正
8. 非离子型聚合物沉淀法
8. 非离子型聚合物沉淀法
优点：
A、体系的温度只需控制在室温条件下；
B、沉淀的颗粒往往比较大，产物比较容易收集；
C、PEG非但不会使pro变性,而且可以提高它的稳定性；
D、PEG无毒，优先使用在临床产品的加工过程中被。
缺点：
A、PEG比其他沉淀剂更难从蛋白质溶液中除去为此需用超滤和液-液萃取来解决；
B、价