文档介绍：HPLC 测定黄连上清片中黄芩苷的含量摘要: 本文用高效液相法对黄连上清片中的黄芩苷的进行了含量测定。固定相为:依利特 hypersil BDS C18 色谱柱( *250*5u ) ,乙***- 甲醇-水- 磷酸( 20: 15: 65∶ ) 为流动相, 检测波长为 315nm ; 黄芩苷在5~ 95μ g?mL-1 范围内呈良好的线性关系。黄芩苷的平均回收率为 % 。本法简便、重现性好、回收率高,可用于黄连上清片中黄芩苷的含量测定。关键词:黄连上清片;黄芩苷;测定黄连上清片由连翘、蔓荆子(炒) 、荆芥穗、薄荷、黄连、大黄、栀子、黄芩、菊花、白芷、桔梗、川芎、石膏、黄柏、防风、旋覆花、甘草组成。黄连上清片具有清热通便, 散风止痛的功效。黄连上清片用于内热火盛引起的头晕脑胀、口舌生疮、咽喉红肿、牙龈肿痛、暴发火眼、小便色黄等。黄芩苷( Baicalin ) 是从黄芩根中提取分离出来的一种黄***类化合物,具有抑菌、利尿、抗氧化、抗白内障、镇静、降压、保肝、降脂、抗炎、抗变态、解痉、抗癌反应等生理效能。黄芩苷还能吸收紫外线,清除氧自由基, 又能抑制黑色素的生成也可用于化妆品。黄芩苷为黄连上清片主要成分之一。本文用高效液相法对黄连上清片中的黄芩苷的进行了含量测定。 1 仪器与试药 仪器: PURIST 超纯水系统( 上海瑞枫生物科技有限公司); HX-0 6 超声波清洗器( 武汉恒信世纪科技有限公司); PHS-550 智能型台式酸度计(杭州陆恒生物科技有限公司); 1800 美国必能信超声波清洗机(北京星越天成科技有限公司); LC-5520 高效液相色谱仪( 北京东西分析仪器有限公司); UV-6 双光束扫描型紫外可见分光光度计(上海美谱达仪器有限公司); Precisa XB220A 电子分析天平(上海精科天美科学仪器有限公司)。 试药:乙***(成都三维化工有限责任公司) 、盐酸(淄博市临淄冰清精细化工厂)、三乙***( 淄博市临淄冰清精细化工厂)、甲醇( 上海祁安化工有限公司)、冰乙酸( 山东佳泰石油化工有限公司)、磷酸( 济南世纪通达化工有限公司)、磷酸氢二铵( 淄博市淄川区鑫川化工厂)、冰醋酸(淄博市临淄冰清精细化工厂)。 2 含量测定 色谱条件:依据查阅文献及考查的结果,确定色谱条件如下[1-6] 。色谱柱为依利特 hypersil BDS C18 色谱柱( *250*5u ) ;乙***- 甲醇-水- 磷酸( 20: 15: 65∶ )为流动相;检测波长为 315nm ;流速 ?min-1 ;柱温: 30℃。理论板数按黄芩苷峰计算应不得低于 2000 。 供试品溶液的制备取黄连上清片适量, 研细, 精密称定至容量瓶内, 加适量流动相超声溶解,放凉,用流动相定容,过 μm 的滤膜,即得。 对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品约 10mg ,置 50 毫升棕色容量瓶中,用流动相超声波振荡溶解并用水稀释至刻度,摇匀,精密吸取 10 毫升,置 100 毫升棕色容量瓶中, 用水稀释至刻度, 摇匀, 即得(每 1mL 溶液中含黄芩苷 20μg)。 阴性干扰试验:按方中比例取连翘、蔓荆子(炒) 、荆芥穗、薄荷、栀子、菊花、白芷、桔梗、川芎、石膏、防风、旋覆花、甘草等原