文档介绍：摘要 Y1975623 摘要随着经济与社会的不断发展,人们的生活水平在日益提高,从而对绿色食品、健康食品有了新的认识【I】。现阶段绝大部分食品中添加的都是合成防腐剂,存在着安全隐患,然而乳酸菌素作为一种天然防腐剂正好迎合了人们的需要f21。乳酸菌素是一类由乳酸菌在代谢过程中产生的抑菌蛋白、多肽或前体多肽,主要用于抑制食品中***菌和致病菌的繁殖与生长。目前国内应用最广泛的Nisin只能抑制食品中革兰氏阳性细菌的生长,而不能抑制革兰氏阴性细菌,因此筛选能够抑制革兰氏阳性、阴性两类细菌的新菌株显得尤为重要。本实验以安徽大学龙河校区农贸市场零售的发酵食品(豆角汁、黄瓜汁、醪糟汁、腐乳、豆瓣酱和泡菜汁)为原材料。首先通过脱脂乳培养基进行富集培养, 然后用无菌水作梯度稀释,涂布,挑取单菌落,连续划线3次予以纯化并保存; 对纯化菌株进行革兰氏染色、乳酸纸层析筛选出产乳酸的革兰氏阳性菌,同时进行试管斜面保存;最后以大肠杆菌()、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills)、金黄色葡萄球菌(usaureus)、酿酒酵母(haromyces cerevisiae)、青霉(Penicillium)和黑曲霉(Aspergillusniger)六种菌作为指示菌,采用牛津杯双层琼脂扩散法检测筛选菌株的抑菌谱大小,并经过有机酸排除、过氧化氢排除等试验,最终确定了来自黄瓜汁中的一株抑菌效果好、抑菌谱广的乳酸菌,本文命名为Hl菌株。实验中通过革兰氏染色、电镜拍照、传统的生理生化试验及16SrDNA分子水平的鉴定,确认所筛菌株Hl为乳杆菌属(Lactobacillus)中的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum JDMl)。随后实验以筛选并鉴定的Hl菌株为出发菌株,进行500 mL三角瓶发酵研究,在此基础上,本实验以10 L小型机械搅拌式发酵罐为反应器,进行发酵动力学的研究。主要是测定菌体浓度(干重法)、葡萄糖含量(DNS法)和抑菌圈直径的大小(牛津杯双层琼脂扩散法)等随时间的变化。利用Luedeking-Piret 方程和Logistic equation来描述各个指标的变化,并进行曲线拟合,最终成功构建了菌体生长、基质消耗和产物合成随时间变化的动力学数学模型. 本实验最后对海藻酸钠包埋植物乳杆菌的制各及其发酵进行了初步研究。优广谱乳酸菌素产生菌的筛选及其发酵研究化得到固定化的最佳工艺条件为:%,%, 离心后菌稀释比为1:5。外部因素对固定化细胞发酵的影响表明:发酵液最适pH ,发酵培养最佳温度为36℃,%的吐温80时,发酵液抑菌圈直径达最大,NaCI含量的多少对固定化细胞的发酵影响很大,应严格控制 NaC!的浓度。固定化细胞的热稳定性研究结果显示,其热稳定性明显提高,连续发酵多批次效果良好。关键词:植物乳杆菌t乳酸菌素;发酵罐;发酵动力学;固定化 n Abstract Abstract Wjnl thedevelopment ofeconomic and society,the levelofpeople's lifeis graduallyincreasing,thus peopleput forward higherrequest , more syntheticpreservative wereadded inmost ofthef-00d,SOexistingpotential safetyproblems,however lactohancillinis anaturalpreservative,andcatering tothe is akindofprotein、polypeptide andpreproghrelin, e fromthecourseoflactobacillusmetabolism,they mainly usedforinhibit- ingcorruption bacteriaandpathogenic bacteriaduring theirreproduction andgrowth. Atpresent,Nisin iswidely used athome,it notonly inhibitsGram-positie bacteriain food,and alsoCan inhibitsGram—negative ,screening anew strain thatCaninhibitGram-·positie bacteriaandGram-·negative bacte