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高效液相色谱仪HPCL使用中常见故障与解决方法.doc

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高效液相色谱仪HPCL使用中常见故障与解决方法.doc

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文档介绍

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超声半个小时。如果压力降至100PSI ( Bar)以下,过滤白头正常,在检查;
(3).把色谱柱出口端取下,如果压力不下降,那么是柱子堵塞。处理方法:如果是缓冲盐堵塞,那么用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保存的物质导致堵塞,那么要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假设按上面的方法长时间冲洗压力都不下降,那么可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上,用流动相冲洗柱子。这时,如果柱压仍不下降,只有换柱子入口筛板,但一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以尽量少用。  
压力过低 压力过低的现象一般是由于系统泄漏,处理方法:寻找各个接口处,特别是色谱柱两端的接口,把泄漏的地方旋紧即可。当然还有一个原因就是泵里进了空气,但此时表现的往往是压力不稳,忽高忽低,更严重一点会导致泵无法吸上液体。处理方法:翻开Purge阀,用3~5ml/min的流速冲洗,如果不行,那么要用专用针筒在排空阀处借住外力将气泡吸出。
.漂移问题 主要包括基线漂移和保存时间漂移。
     一般说来,机器刚起动时,基线容易漂移,大概要半个小时的平衡时间,如果你用了缓冲溶液或缓冲盐,还有就是在低波长下〔220nm〕平衡时间相对会比拟长,但如果你在实验过程中发现基线漂移,那么你要考虑下面的原因:
1、柱温波动。解决方法:控制好柱子和流动相的温度,检查是否有翻开的窗户或空调对着柱温箱。  
2、流通池被污染或有气体。 解决方法:用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池〔最好断开柱子〕。如有需要,可以用1N的***〔不要用盐酸〕。
3、紫外灯能量缺乏。解决方法:更换新的紫外灯
4、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成。解决方法:检查流动相的组成,使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂。
5、样品中有强保存的物质〔高K’值〕以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。解决方法:使用保护柱,如有必要,在进样之间。在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子。
6、检测器没有设定在最大吸收波长处。解决方法:将波长调整至最大吸收波长处
7、流动相的PH值没有调节好。解决方法:加适量的酸或碱调至最正确PH值
     保存时间重现是液相性能好坏的一个重要标志,同一种东西,两次的保存时间相差不要超过15s,超过了半分钟可看做保存时间漂移,就无法进展定性,你要考虑以下原因:
1、温控不当。解决方法:调好柱温,检查是否有翻开的窗户或空调对着柱温箱。
2、流动相比例变化。解决方法:检查四元泵的比例阀是否有故障
3、色谱柱没有平衡。解决方法:在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱
4、流速变化。解决方法:重新设定流速
5、泵中有气泡。解决方法:、从泵中除去气泡
峰型异常问题 峰型问题是液相的主要问题,在做液相过程中,我们就是要变换不同的条件来改善不好的峰型,对于各种各样的异常峰,要区别对待,从主要问题出发,一个一个加以解决。  
1、色谱图中未出峰

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