文档介绍：农业生物技术学报 JournalofAgriculturalBiotechnology2004,12(3):288~293
·研究论文·
水牛α-干扰素基因的克隆与表达及其抗病毒活性*
史喜菊夏春汪明**
(中国农业大学动物医学院,北京 100094)
摘要:从福安和富钟水牛(waterbuffalo,WB)基因组中克隆了其α-干扰素基因 Fa- 和 Fz- ,并分别与
pQE30 表达载体连接、测序后用 IPTG 诱导表达。结果表明,水牛 IFN-α基因全长 498 个核苷酸,编码 166 个氨基酸的成熟蛋
白,与已报道的牛α-干扰素(BoIFN-α)8 个亚型氨基酸序列同源性为 %~%,均为 BoIFN-α的新亚型。SDS-PAGE
和 Westernblot 分析表明,表达产物分子量约为 20kD,表达量占菌体总蛋白的 25%,表达产物以包涵体形式存在。经包涵体提
取、尿素变性和复性后,重组水牛α–干扰素(rWBIFN-α)在 CEF/VSV 和 MDBK/VSV 细胞系上的活性分别为 105 U/mg 和
106 U/mg。并且,rWBIFN-α对传染性牛鼻气管炎病毒(infectiousbovinerhinotracheitisvirusIBRV)感染有抑制作用。
关键词:水牛; α- 干扰素基因;抗病毒活性
CloningandExpressionofWaterBuffal -α
GenesandItsAntiviralActivities*
SHIXi-JuXIAChunWANGMing**
(CollegeofVeterinaryMedicine,ChinaAgriculturalUniversity,Beijing100094,China)
Twointerferon-α genes,Fa- andFz- , wereclonedfromgenomicDNAofFuan-and
Fuzhong-waterbuffalosbyPCR,binantexpression
,encodingamaturepolypeptidewith
%~%ofaminoacidsequenceidentitieswithpreviously
publishedeightBoIFN-α -binantproteinswas
expressedininclusionbodiesin binantproteinswere25%ofthe
-α
were105 U/mgand106 U/mginCEF/VSVandMDBK/-VSVcelllines,,rWBIFN-α hadgoodeffects
aga