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鸡α干扰素基因克隆、原核表达及抗病毒活性研究.pdf

上传人:1322891254 2014/6/30 文件大小:0 KB

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鸡α干扰素基因克隆、原核表达及抗病毒活性研究.pdf

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文档介绍:硕士学位论文河南农业大学年鸡壁王拢塞墨国杰隆负巳”谠潭煌释芪崔堡窒麴援畜禽疫痘佥王痘厦堂盈鱼痤主中国郑州导师姓名研究方曩题目向
研究生虢宇赫≥络导师躲。易啾虢秽弓导师签锨⋯导签醛日期:艚舀月蝗冢盒文雕同В哉牛日期:“年占月/幺百河南农业大学学位论文独创性声明、使用授权及知识产权归属承诺书日期:.≯年‘月,;日注:保密学位论文在解密后适用于卒授权书。学位论文使用授权及知识产权归属承诺年月本人完全了解河南农业大学关于保存、使用学位论文的规定,即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本;学校有权保存提交论文的印刷本和电子版本,并提供目录检索和阅览服务,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人同意河南农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。本人完全了解《河南农业大学知识产权保护办法》的有关规定,在毕业离开河南农业大学后,就在校期间从事的科研工作发表的所有论文,第一署名单位为河南农业大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河南农业大学所有,否则,承担相应的法律责任。学位论鸡扇潘鼗蚩寺。吮泶翱共《净钚学位文题目级别学生学科导师姓名专业崔保安教授如需保密,解密时间日日期:硕士研究生研究宋凌云预防兽医学学位论文是否保密否
致谢本论文是在导师崔保安教授悉心指导和亲切关怀下完成的。三年来,尊敬的导师在学习、工作、生活中给了我无微不至的关怀。导师那高尚的道德修养、渊博的知识、严谨的治学态度、求实开拓的进取精神、严于律己的生活原则、正直的人格魅力,将使我受益终生。崔老师不仅教会了我怎样做事,更教会了我怎样做人。在此,谨向尊敬的崔老师致以最崇高的敬意和最衷心的感谢感谢培养我的母校及传授我知识的全体老师感谢导师组卢中华教授、王川庆教授、宁长申教授、王泽霖教授、张龙现教授、夏平安副教授、张改平研究员、李文刚教授、许兰菊教授、贺秀媛副教授对我的指导和帮助,在此致以最诚挚的谢意感谢陈红英老师、魏战勇老师、张红英老师、王学斌老师、杨明凡老师、杨霞老师,舒德广老师、张素梅老师、徐端红老师、王莉老师、王亚宾老师、王彦斌老师等牧医工程学院的全体老师三年来给予的热心帮助感谢和我一起做试验、一起探讨问题的方忠意、段廷云、董振杰同学及牧医工程学院全体级研究生感谢师兄刘占通、金喜新,师姐牛春玲,师弟李小康、赵现敏、王东方、高文明、郭小参、王林青、贾松涛,师妹赵丽、郑兰兰、王远阁、吕小丽、管倩、谢彩华等在我实验和学习过程中给予的无私帮助感谢我的父母、弟弟、弟妹及亲朋好友,在我多年的学习和生活中的关怀和爱护,是他们的支持和理解鼓励我取得了一个又一个进步感谢我的爱人程钰在我求学期间所给予的关心,理解、支持和生活上无私的照顾,使我无后顾之忧,顺利完成学业再次感谢所有关心和帮助过我的各位老师、同学以及由于本人疏忽未提到的亲人、同学和好友行凰懈栉野镏娜嗣莑我所取得的任何成绩都离不开您们的指导和关注
透径盖泻螅俳洳迦胪荌和品儿双酶切的原核表达载体捅妥家禽传染性疾病是养禽业最大的威胁。给养殖业造成严重经济损失。干扰素且焕重要的细胞因子,具种属特异性,具有广谱的抗病毒、抗细胞增殖、免疫调节等多种生物活扩增得到的特异性片段克隆入珊载体中,转化感受态细胞,运用蓝白斑筛测序结果表明,得到了上述銎分旨干扰素基因,大小均为鲂藕烹模共编码霭被帷S肈序列分析软件对其进行同源性分析,,构建了鸡扇潘卦吮泶镌靥錺W;惺芴赴鸍,经⒚盖屑并进行序列测定,结果表明,将成熟肽蛋白基因正确地插入到原核表达载体肠杆菌械谋泶铮泶锊锞璖—。表达产物以包涵体形式存在,包涵体经变性、复性处理后,用细胞病变抑制法测定活性。结果表明重与人和哺乳动物比较,鸡难芯肯喽岳此当冉现秃蟆1狙芯坷锰逋獗泶锛际醭功研制重组鞍祝Q兄瓶辜的多克隆抗体和单克隆抗体以及鞍性。因此研发具有广谱抗病毒作用的鸡干扰素具有重大的意义。参照系锹降募干扰素基因序列设计一对引物,应用际踔苯哟雍幽洗面积饲养的罗曼鸡、海兰鸡及地方品种固始鸡肝组织基因组欣┰黾干扰素基因。将选、质粒ḿ懊盖屑ㄉ秆⊙粜钥梢删辏⒔秆〉难粜跃晁屯罅ι锊庑颉%以上,,重新设计一对引物,从载体中扩增鸡口干扰素成熟肽蛋白基因用的目的位点,重组质粒—;芴寰鶰后用诱导,实现了鸡扇潘卦诖处出现了特异性条带。用甇几于℃诱导表达产物最佳,用鼠抗鸡タ寺】固遄饕豢梗备氧化物酶标记的羊抗鼠抗体作二抗,组鸡。干扰素在细胞上抗牟《净钚晕./。的生物学特性的研究奠定基础。关键词:鸡。干扰素;基因克隆;大肠杆菌;表达
南鬃凼细胞因子的研究概况制,他们首先提出细胞产生的可溶性物质能介导生物活性。年,等⋯首先发现其它病毒的复制,因而将其命名为干扰素琁晌1徽矫牡谝桓类成纤维细胞