文档介绍：谈谈你对月季的认识
A：高杆
a：矮杆
B：抗病
A：感病
高杆抗病
矮杆感病
↓
F1：
高杆抗病AaBb
单倍体：
AB
Ab
aB
ab
↓
↓
↓
↓
花药培养
↓
↓
↓
↓
↓
物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个花粉管细胞核和两个精子。不是所有植物都形成三核花粉粒
2N
N
N
N
〔二〕产生花粉植株的两种途径
①
②
移栽
花药中的花粉
胚状体
脱分化
愈伤组织
花药中的花粉
脱分化
分化
丛芽
再分化
丛芽
诱导
生根
体细胞胚〔胚状体〕：在组织培养过程中，某些细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似
原因：培养基中的激素种类及浓度配比
1、材料的选择
不同植物的诱导成功率不同.
同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有直接的影响. 〔一般选月季的初花期〕
适宜的花粉发育期〔单核居中期与靠边期之间〕
2、培养基的组成〔 MS培养基+不同比例的植物生长调节激素〕
此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等
(三)、影响花药培养的主要因素
注意：选择最适宜的花粉发育时期:单核期
①不选择单核期之前花药原因：花药质地幼嫩，容易破碎；
②不选择单核期之后花药原因：花瓣开始松动，给材料消毒带来困难困难；
③挑选单核期花药方法：应中选择完全未开放的花蕾，微生物少，易消毒。
实验操作
一、材料的选取
二、材料的消毒
三、接种和培养
〔一〕材料选取
2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。
方法：醋酸洋红法(将染色体染成红色)
焙花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色)。
1、从花药看：月季的初花期
从花粉看：单核期
从花蕾看：完全未开放的
花药〔载玻片上〕→1%的醋酸洋红1滴→用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片→镜检〔花粉粒的细胞核被染成红色〕
花药〔在卡诺氏固定液中处理20min〕→取出，置于载玻片上→焙花青－铬矾溶液染色→盖上盖玻片→镜检〔花粉粒的细胞核被染成蓝黑色〕
月季花药培养时的花粉粒最好是〔 〕
A、四分体时期 B、二核或三核花粉粒
C、单核期
C
〔二〕材料的消毒
5、无菌水冲洗3～5次
花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态
1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒
2、无菌水清洗
3、无菌吸水纸吸干花蕾外表的水分
4、%的***化***溶液中2～4分钟 〔质量分数为1%的次***酸钙溶液或饱和漂白粉溶液〕
为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？
答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。
为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？
讨论：
〔三〕接种和培养
1 灭菌后花蕾，要在 下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。
3 通常每瓶接种花药 ，温度控制在 左右， 。幼小植株形成后才 。
2 在剥离花药时，要尽量 〔否那么接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织〕，同时还要彻底 ，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。
一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。
4 进一步鉴定和筛选：常常会出现染色体倍性的变化
无菌条件
不损伤花药
去除花丝
7-10个
25℃
不需要光照
需要光照
主要原因是花粉管核和生殖核融合造成的
植物组织培养技术与花药培养技术的比较
项目
植物组织培养
花药培养技术
相同点
1 培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。
2 都经过了脱分化
不同点
1 离体培养的外植体为体细胞。
2 有丝分裂的过程，染色体数量不变。
1 花粉是生殖细胞，得到的单倍体植株，弱小且高度不育。
2秋水仙素处理，染色体加倍，恢复正常的染色体数，为纯种。
2. 培养基的组成
在1000mL MS培养基配方中添加
—D KT IAA 4mg
。
课堂小结：
一、花药培养与单倍体育种之间的关系；
、被子植物