乙肝病毒DNA实验室检测.ppt

文档介绍：LOREM IPSUM DOLOR1、荧光定量PCR技术2、乙肝病毒的感染3、HBV-DNA与临床荧光定量PCR技术荧光定量PCR技术?Polymerase chain reaction(PCR),聚合酶链式反应,是一种DNA的快速扩增技术。PCR技术通过两个短的称为引物的DNA小片段和一种耐热酶(TaqDNA聚合酶)的作用,经过高温变性、低温退火、适温延伸高温变性、低温退火、适温延伸三个步骤在3个小时内反复循环25-30次,把特定的DN***段扩增1000万倍。?每个PCR体系含4种主要成分:含有待扩增序列的含有待扩增序列的DNADNA模板模板、引物、、引物、TaqDNATaqDNA聚合酶、脱氧核糖核酸三磷酸(聚合酶、脱氧核糖核酸三磷酸(dNTPdNTP))荧光定量PCR技术PCR 反应过程5’5’3’3’’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’反应组分变性5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’延伸5’3’5’3’5’3’5’3’3’5’3’TaqTaq5’5’重复退火5’3’5’3’5’3’5’3’5’5’3’3’5’3’5’3’循环24个拷贝循环38个拷贝5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’3’5’5’3’5’3’5’3’5’3’荧光定量PCR原理插入染料法SYBR Green I杂交探针法(最常用)TaqManTaqMan探针5’5’3’3’’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’反应体系变性5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’Taq?5’3’RQProbe5’3’RQ