文档介绍：第!!卷"#期#$""年"#月宁夏医科大学学报%&’()*+&,-.)/0.**+5).62(:!"#$%"&’(()’!!)!)%!!&!%’$!论著!热应激处理对精原细胞增殖的影响马文智!,),王燕蓉!,田见晖)(!*宁夏生殖与遗传重点实验室,生育力保持省部共建教育部重点实验室,宁夏医科大学,银川#+’’’$;)*农业部动物遗传与育种重点实验室,中国农业大学,北京!’’!(&)摘要:目的了解热应激对小鼠精原细胞增殖情况的影响,探讨高温造成男性短期不育的机制"方法,周龄雄性昆明白小鼠于$&A水浴中进行睾丸局部热应激处理!+57P,于一次性处理后!#!)#!,#)+D以及&+D通过HM21免疫荧光组化法检测精原细胞增殖情况;于一次性处理后$#)#!’#!+#)’D以及)+D通过03%HM0检测c>2K和=MK基因表达情况"结果在热处理后第!)D和!,D,精原细胞增殖系数分别为))B和#+B,明显低于(!.’*’+)对照组的(&B;)+D时,精原细胞增殖水平恢复至正常水平"c>2K5021的表达量在处理后$-到第!+D显著下调(!.’*’+) ;=MK5021的表达量在热处理后第$-到第!’天显著下调(!.’/’+)!结论睾丸局部热应激处理使得c>2K和=MK基因表达在处理后短时间内下调,精原细胞增殖短时间内抑制"关键词:热应激;精原细胞;增殖;干细胞微环境中图分类号:0&)!*!文献标识码:1收稿日期:#$"":$;:#<基金项目:宁夏自然科学基金项目(2n"$E$)作者简介:马文智(";<;:) ,男,博士,讲师"通信作者:田见晖(";>E:) ,男,教授,博士,研究方向:胚胎生物技术"4:5678:U76P9-?;6^*VD^*;P生理条件下,哺乳动物阴囊温度大约比体温低)i,A,从而使精子正常发生[!]"已有研究证明,高温能够引起小鼠和大鼠生精细胞凋亡造成短暂轻度不育或者完全的不育[)%+]"$)A下)’57P热应激处理小鼠),D后,睾丸重量明显降低[)]"睾丸重量下降开始于热处理($&A,)’57P)后$D,在热处理后!+D重量达到最小,然后逐渐开始恢复"热处理后",D,睾丸重量仍然没有完全恢复到正常的水平[+]"雄性小鼠热处理($)A,&’57P)后的第!’i&)天出现不育,在恢复生育后窝产仔数也减少[$]"0<;EVUU等)’’!年报道热处理($&A,)’57P)导致处理后)&i),D小鼠窝产仔数减少[+],出现以上现象的主要原因是热应激诱导的生殖细胞凋亡"3O24G检测发现小鼠生精细胞凋亡开始积聚的最早时间是热处理后$-["],)$-时,更多的曲细精管出现凋亡细胞,并且这些凋亡细胞大多数是精母细胞,而精原干细胞似乎没有受到影响[+]"胶质细胞源性神经营养因子[#](***@8768;V88DVQ7\VDPV^eQ<UQ<T-7;]6;U<Q,c>2K)与干细胞因子(WUV5;V88]6;eU<Q,=MK)分别调控精原干细胞的再生和分化[,%!’],对精原细胞增殖起到关键作用"鉴于热处理后曲细精管中精原细胞增殖情况尚不清楚,本研究选取热处理后生精细胞最为敏感的特定阶段,通过增殖细胞核抗原(HM21)标记法和03%HM0分别检测睾丸中精原细胞增殖情况和c>2K与=MK基因表达情况,探讨热应激对精原细胞在精子发生恢复