农杆菌的扩繁.doc

文档介绍：农杆菌的扩繁
农杆菌的扩繁
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农杆菌的扩繁
AB培养基的配制:
① 配制20倍的AＢ bｕｆｆｅｒ母液，单独灭菌
　 　 　 １ Ｌ 　　 　　20０ ｍl
K2HＰO4 　 　 　　农杆菌的扩繁
农杆菌的扩繁
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农杆菌的扩繁
AB培养基的配制:
① 配制20倍的AＢ bｕｆｆｅｒ母液，单独灭菌
　 　 　 １ Ｌ 　　 　　20０ ｍl
K2HＰO4 　 　 　　 60 g 　 　 12　g
ＮaH2PO4 2０ ｇ　 　　 　 ４ g
② 配制2０倍的ＡＢ Ｓａltｓ母液，单独灭菌
１ L　 　 200 mlﻩ
NH４Cｌ 　　 　２０ g 　　 　 　 4 g
MgSO4·７H2O ６　g　 　 　 　 　 ｇ
KCl　 　　　 　 　 3 g 　 　　0．6 g
CaCｌ2　 g 　 　 　 　 g(40 ｍg)
FeSＯ4·7H２O 50　mg 　 　　 10 mg
　 　
1 L
１00　ｍl
autoclave
Glucose (ｇ）
５

Agar (g)
１5

H２O (ｍl）
９00
９0　
AＢ　ｂuｆｆer(mｌ)
50
5
AB salｔs (mｌ)
50
5
待培养基温度降至60℃ 膜滤器过滤灭菌的卡那霉素(Kanamycin suｌfatｅ,Km)
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农杆菌的扩繁
５0 mg/L。
ﻬ发根农杆菌培养基（ＹＥＢ)
1　Ｌ
300 ｍｌ
200 ml
Beeｆ ｅxtｒact（g)
5
1．5
1
Ｙeast　exｔraｃt(g)
1

0．2
Pｅptone(g)
5

1
Sｕｃrose（