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实验五血浆凝固酶实验与肥达实验课件.ppt

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实验五血浆凝固酶实验与肥达实验课件.ppt

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实验五血浆凝固酶实验与肥达实验课件.ppt

文档介绍

文档介绍:关于实验五血浆凝固酶实验与肥达实验
现在学习的是第一页,共17页
目录
一 血浆凝固酶实验
二、肥达氏反应实验
现在学习的是第二页,共17页
熟悉血浆凝固酶试验的意义。
目的:
一 血浆凝固酶实验
材料:
关于实验五血浆凝固酶实验与肥达实验
现在学习的是第一页,共17页
目录
一 血浆凝固酶实验
二、肥达氏反应实验
现在学习的是第二页,共17页
熟悉血浆凝固酶试验的意义。
目的:
一 血浆凝固酶实验
材料:
菌种 : 金黄色葡萄球菌
表皮葡萄球菌
其他: 新鲜兔血浆(或人血浆)、
NS等
现在学习的是第三页,共17页
纤维蛋白原+血浆凝固酶 不溶性纤维蛋白
玻片法原理:
一 血浆凝固酶实验
细菌形成凝块
黏附于细菌
现在学习的是第四页,共17页
充分混合,观察结果。
结果:阳性——无法混匀,细菌在血浆中聚集成团块;
阴性——呈均匀混浊 ;
血浆+NS+细菌1 血浆+NS+细菌2
方法:
一 血浆凝固酶实验
金黄色葡萄球菌
表皮葡萄球菌
意义:
鉴定致病性与非致病性葡萄球菌。
现在学习的是第五页,共17页
目的:
二、肥达氏反应实验
1、掌握肥达试验的原理,操作方法及结果判断。
2、熟悉其临床意义。
现在学习的是第六页,共17页
一、肥达氏反应实验
材料:
1.标本 感染待测血清(稀释度1:20)。
2.试剂 伤寒沙门菌菌体抗原(O)及鞭毛抗原
(H)、甲型副伤寒沙门菌鞭毛抗原及乙型
副伤寒沙门菌鞭毛抗原。
3.其他 微孔反应板、50μl移液器、吸头、水浴
箱等。
现在学习的是第七页,共17页
原理:
一、肥达氏反应实验
现在学习的是第八页,共17页
(1)在微孔反应板编号4排6列。
(2)每孔加入生理盐水50μl 。
(3)吸取待检血清50μl加入每排第1孔,连续倍比稀释
到第5孔。从第5孔吸出50μl弃去。第6孔为对照管。
这样每排从第1孔至第5孔的血清稀释度为1:40,
1:80,1:160,1:320,1:640。
(4)每排每孔加入对应的伤寒菌液50μl 。
(5)混匀,置于52℃水浴箱中1h后观察 。
方法:
二、肥达氏反应实验
现在学习的是第九页,共17页
50
实验方法
50
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50
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50
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50
50
1:40
1:80
1:160
1:320
1:640
50
弃掉
1
2
3
4
5
50
6
50
NS(μl )
待测血清
对照管
50
50
50
50




灭活的伤寒菌液
50μl
50μl
50μl
50μl
50μl
50μl
抗体稀释度
彻底混匀
52℃, 1h
二、肥达氏反应实验
现在学习的是第十页,共17页
结果:
先观察对照管,应无凝集现象。
“++++” —细菌全部凝集,液体清澈,孔底形成大片凝集物。
“+++” —细菌大部分凝集,液体澄清,孔底明显凝集物。
“++” —细菌部分凝集,液体半澄清,孔底有明显凝集物
“+” —少量细菌凝集,液体较混浊,孔底少量凝集物。
“-” —液体混浊,细菌无凝集。与对照孔相同。
二、肥达氏反应实验
现在学习的是第十一页,共17页
效价(滴度)的判定:
产生明显凝集反应(++)的最高血清稀释度为血清中所测抗体的效价。
效价愈高,表示血清中所含该抗体愈多。
如血清的最低稀释度仍无凝集,或血清效价低于1:80 ,
则为阴性,应报“<1:80”;
如果血清的最高稀释度1:1280仍呈“++”或更强凝集,则血
清效价应报“>1:1280”。
二、肥达氏反应实验
现在学习的是第十二页,共17页
实验预期结果
+
很小的凝集颗粒
混浊
-
无凝集现象
与对照相同
++
小、部分凝集块
中等混浊
+++
大多凝集管底
轻度混浊
++++
大的凝集块
清亮
凝集程度
沉淀
上清
现在学习的是第十三页,共17页
H与O抗体的性质及其消长意义
预防接种; 非特异性回忆反应
感染早期、
其他沙门菌引起的交叉反应
患肠热症可能性大

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