文档介绍:实验题目】
细胞膜通透性实验
【实验目的】
1、观察溶血现象并掌握其发生机制。
2、了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。
【实验材料与用品】
试剂:%NaCl溶液、%NaCl溶液、L甲醇溶液、L丙三醇溶
液、6%葡萄糖实验题目】
细胞膜通透性实验
【实验目的】
1、观察溶血现象并掌握其发生机制。
2、了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。
【实验材料与用品】
试剂:%NaCl溶液、%NaCl溶液、L甲醇溶液、L丙三醇溶
液、6%葡萄糖溶液、2%TritonX-100
器具:离心管、试管架、滴管、显微镜、离心机
材料:鸡血红细胞
【实验原理】
细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择性屏障,它是一种半透膜,可选择性控制物质
进出细胞。各种物质出入细胞的方式是不同的,水是生物界最普遍的溶剂,通透性高(肾小
管、肠上皮、植物根细胞更高),水分子可以从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一
侧扩散,这种现象称为渗透。渗透作用是细胞膜的主要功能之一。
溶血现象
将红细胞放在低渗盐溶液中,水分子大量渗到细胞内使细胞涨破,血红蛋白释放到介质
当中,介质由不透明的细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液(此时的细胞膜收缩,会略有
不溶性内容物),这种现象称为溶血。
红细胞在等渗盐溶液中短时间之内不会发生溶血,但是由于红细胞的细胞膜对不同物质
的通透性不同,时间久了,膜两侧的渗透压平衡会被打破,也会发生溶血。
由于各种溶质透过细胞膜的速度不同,因此发生溶血的时间也不相同。发生溶血现象所
需的时间,可以作为测量某种物质进入红细胞速度的指标。即溶血时间对应着穿膜速度。
物质穿膜运输的类型
(1)被动运输(不耗能)
被动运输分为简单扩散(顺浓度梯度扩散)和协助扩散。(通道:载体蛋白、通道蛋白)
(2)主动运输(耗能)
需要跨膜载体蛋白的协助,这些载体蛋白起到泵的作用,有选择性地把专一溶质逆浓度梯度的穿膜运输。
影响物质穿膜通透性的因素
(1)脂溶性越大的分子越容易穿膜(非极性的物质比极性的物质更容易溶于脂类物质)
(2)小分子比大分子更容易穿膜(小的非极性分子,如Q、CO等)
(3)不带电荷的分子容易穿膜(离子难溶于脂质物质,离子带水膜使体积增大)
(4)亲水性分子和离子的穿膜要依赖于专一性的跨膜蛋白
【实验步骤】
、大体流程
、具体操作
.取鸡血6ml,加%NaC溶液4ml,在1000r/min条件下离心5分钟;(RBCE积量不少于)
.将上述离心后的红细胞按沉淀量配成50麻度;(总体积应不少于)
.每组取6支试管,分别加入如下溶液各3ml:
%NaC溶液
%NaC溶液
L(L等渗)甲醇溶液
L(L等渗)丙三醇溶液
6%(5狮渗)葡萄糖溶液
2%(嗡渗)TritonX-100
.向上述6支试管中分别加入504细胞悬液1滴,轻摇混匀,观察试管中是否有溶血现象
发生(观察时间1小时),记录溶血时间,并于显微镜下观察各溶液的细胞。
【实验结果与分析】
图l:%NaCl溶液图2:%NaCl溶液图3:L甲醇溶液
图4:丙三醇溶液(20min)图5:丙三醇溶液(40min)图6:丙三醇溶液(60min)
图7:葡萄糖溶液图8