文档介绍：现在学****的是第1页，共25页
实验目的
1、进行菊花的组织培养
2、尝试植物激素的应用
现在学****的是第2页，共25页
通过必修课的学****我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植的，所以要特别认真仔细，以防杂菌污染。
现在学****的是第15页，共25页
（四）培养
接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养。培养期间应定期消毒，温度控制在１８～２5℃， 。观察记录生长情况，并照相存档。
2-3周后将生长健壮的丛状苗在无菌条件下一个个转入生根培养基中，在上述条件下继续培养
现在学****的是第16页，共25页
（五）移栽
（六）栽培
生根后，将苗移至消毒的草炭土或蛭石中，用玻璃罩或塑料布保持80%以上湿度，2-3天后打开玻璃罩低湿度锻炼
转移至土中培养（定植）
现在学****的是第17页，共25页
三、结果分析与评价
（一）对接种操作中污染情况的分析
接种3～4 d后，在接种操作中被杂菌污染的培养物会表现出被污染的现象。请学生适时统计污染率，分析接种操作是否符合无菌要求。
现在学****的是第18页，共25页
（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化
观察实验结果，看看是否培养出了愈伤组织，记录多长时间长出愈伤组织。统计更换培养基后愈伤组织进一步分化成根和芽的比例和时间。
（三）是否进行了统计、对照与记录
做好统计和对照，填好结果记录表，培养严谨的科学态度。从实验的第一步开始就要求做好实验记录，实验小组配制不同培养基，如诱导愈伤或直接分化丛芽的培养基，然后做不同配方的比较。
现在学****的是第19页，共25页
（四）生根苗的移栽是否合格
生根苗移栽技术的关键是既要充分清洗根系表面的培养基，又不能伤及根系。一般使用无土栽培的办法。培养基质要提前消毒，可以向培养基质喷洒质量分数为5%的高锰酸钾，并用塑料薄膜覆盖12 h。掀开塑料薄膜后24 h才能移栽。新移栽的组培苗要在温室过渡几天，等壮苗后再定植大田或进行盆栽。学生可以在课后统计自己移栽的成活率，看看移栽是否合格。
现在学****的是第20页，共25页
四、本课题知识小结
菊花的组织培养
原理：细胞的全能性
条件
基础
概念
植物组织培养的基本过程：
环境因素（温度、PH、光照）
外植体的选择
营养因素
植株
根、芽
愈伤组织
外植体
影响植物组织培养的因素
植物激素配比
实验过程：
移栽
栽培
培养
接种
外植体消毒
制备MS培养基
现在学****的是第21页，共25页
五、练****br/>植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。
外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。
１．在植物组织培养过程中，为什么要进行一系列的消毒，灭菌，并且要求无菌操作？
２．在选取菊花茎段的时候，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？
现在学****的是第22页，共25页
3、不同植物、不同组织的生根和生芽是否都可以使用与本实验相同的生长素和细胞分裂素浓度
4、本实验用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，为什么？
5、如果在自然界取植物样本进行组织培养，你认为应采取什么措施保证样本不被污染？
任何植物物种或品种都不可贸然使用与本实验相同的生长素和细胞分裂素浓度，必须要套索使用如何合成激素和何种激素浓度才可以。学****者可以参考已有文献上成熟的经验，也可以自己探索
植物中存在的天然激素有相应的使之分解的酶，这样，天然激素在植物体内作用和存在的时间就较短，而人工合成的激素在植物中没有相应使之分解的酶，所以作用和存在时间长，作用效果也更明显。
（1）操作环境洁净（2）植物样本洁净（3）操作过程无菌
因为污染物的来源是操作过程中和植物本身带来的，主要是微生物的污染，要采用各种措施防止微生物污染，具体做法和操作在微生物培养实验中已经介绍。除认真消毒除菌外，操作敏捷迅速，也可以降低污染率
现在学****的是第23页，共25页
6．右图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答： （1）步骤①是 ，最常用的方法是 。 （2）步骤③一般常用的化学试剂是 ，目的是 。
(3)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是 ，其中步骤④相当于
，步骤⑤相当于