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水稻ω-6脂肪酸去饱和酶基因克隆与功能研究.pdf

上传人:2024678321 2014/10/19 文件大小:0 KB

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水稻ω-6脂肪酸去饱和酶基因克隆与功能研究.pdf

文档介绍

文档介绍:中文摘要照相比在各个组织中分布无明显变化;在叶中,黑暗处理条件下,在叶下的水稻发芽率、电导率和莔,发现转基因株系与野生型相比,能够显著的分布主要受温度的影响。不饱和脂肪酸是植物膜系统的重要组份之一,它在低温条件下维持细胞功能和保护植物体方面起到重要的作用。因此,,在┒舜嬖谧拍谥释ㄎ肉细胞和维管束组织中的表达量有所下调,而冷胁迫条件下的主显示水稻基因能够互补拟南芥突变体表型;同时,将伪尉基因导入到籼稻中,经过潮霉素筛选获得代转基因种子,我们检测了低温条僻:水稻是我国最主要的粮食作物之一,主要起源于热带和亚热带地区,其地理法增加不饱和脂肪酸含量对培育水稻耐低温育种的研究意义重大,刻不容缓。本论文中采用的方法从水稻镀锌寺〉奖嗦胨灸质网∞一舅崛ケズ兔富虻目7旁亩量,全长,包含霭基酸,命名为锹己牛篘瓼。焖飨允舅肫渌镏所必须的序列导肽,聚类分析显示该基因属于组成型表基因。水稻为组成型表达基因,该基因在叶片中的表达量明显高于其它器官。原位检测结果表明:在根中,在黑暗和冷胁迫条件下,的表达与对要在表皮细胞中积累。—峁允荆菏艿皆诓煌に卮碇螅基因的表达量上升。构建酵母真核表达载体,经醋酸锂法转化酿酒酵母,通过缺尿嘧啶培养基筛选获得多拷贝阳性克隆菌株。结果表明同源重组的酵母能正常表达含有目的基因的融合蛋白,同源重组酵母在低温下的菌落生长状况明显好于空载转化酵母,表明基因的转入提高了酵母对低温的耐受性。构建蛙卵表达载体甇捎孟晕⒆⑸涞方法转入蛙卵细胞中,外源施加油酸之后,可以监测到亚油酸的生成。构建重组植物表达载体甇ü└司榈冀玂基因转入拟南芥突变体中,经潮霉素筛选获得代转基因种子。结果耐受低温胁迫。更为重要的是,过表达基因的水稻株系,在生殖生长期能够表现出显著的耐寒性,低温处理之后,产量比对照组高%。说明在低温条件下行使去饱和酶的功能,提高了细胞膜的流动性,从而提高了转基因水稻对低温的抗性。上述研究结果表明,在低温胁迫条件下,∮牍δ苎芯
能力,证明綝蛟谒灸秃址矫嬗凶殴憷ǖ挠τ们熬啊主体内亚油酸含量的积累,改善了绌胞膜的流动性,从而提高了宿主对低温耐受关键词:水稻,脂肪酸去饱和酶,低温,农艺性状,中图分类号:∮牍δ苎芯
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等人发现正常生长条件下,⑾郑現紿~锺因受到低温胁迫的诱参镏舅岬纳砉δ植物脂肪酸与植物抗寒性导,同时发现业油酸和总体的脂肪酸含量上升。暗示朋必鞋因在细胞膜适应低温在于烃链的长短、是否饱和以及双链的位置和数目等。根据烃链的饱和程度,可大多数植物组织中不饱和脂肪酸占脂肪酸总量的%以上。不同细胞内膜系统的脂肪酸组成显著不同,它们不仅提供了大量保守自由能,并且具有影响植物在对低温的适应过程中,植物膜脂脂肪酸去饱和酶的活性增强,不饱和脂处理鼻榭鱿拢晗档拇婊盥手皇欠亲;⑾掷曰蚴艿降臀滦财鹊挠盏迹泶锪上调,并且亚麻酸含量和总的脂肪酸含量都要高于对照珻至今从生物体中分离的脂肪酸已有百种以上。在组织和细胞中,它们绝大部分为结合形式,极少数以游离形式存在。所有的脂肪酸都有一个长的烃链和一个羧基末端。烃链以线性为主,分枝或环状为数不多。不同脂肪酸之间的区别主要将脂肪酸分为:⒈ズ椭舅,其烃链为饱和,没有双键;⒌ゲ槐ズ脂肪酸,含有一个双键;⒍嗑鄄槐ズ椭舅屑父鏊ḿ其中幂滞吵莆2槐ズ椭舅。根据烃链的长短,可将脂肪酸分为:⒍塘粗舅幔噶闯の个碳的脂肪酸;⒅辛粗舅幔~个碳;⒊ち粗舅幔闯び鲆陨咸荚幼槌伞生长发育、,深人了解脂肪酸去饱和酶的种类、数量及其编码基因的各种性质对于定向改变植物的脂肪酸组成具有重要的理论和实际意义。肪酸的比例增加。膜脂不饱和脂肪酸含量提高,膜脂相变温度会降低,植物的低温抗性相应提高。因此,不饱和脂肪酸具有防止植物遭受低温损伤的作用明显的差异。但是,在处理天之后,野生型能够存活而突变体则全部死亡籇。通过的方法沉默杨树内源的例陇基因,%。在结果表明多聚不饱和脂肪酸的水平直接影响杂交白杨对低温的耐受能力胁迫方面起到直接作用瓺疕.:复旦大学博士论文水稻一舅崛ケズ兔富卓寺∮牍δ苎芯.
等人发现正常生长条件下

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