茶氨酸分析方法.doc

文档介绍：


精确称量茶氨酸10mg，用蒸馏水溶解，并定容至100ml的容量瓶中，过滤。.
OPA试剂的配制
O-phthalaldehyde(OPA):


精确称量茶氨酸10mg，用蒸馏水溶解，并定容至100ml的容量瓶中，过滤。.
OPA试剂的配制
O-phthalaldehyde(OPA):100mg
巯基乙醇:100ul
：PH : 20ml
准确称取OPA试剂100mg,,加入100ul的2-巯基乙醇,，过滤，即成为OPA试剂
流动相的配制
A：10mM磷酸缓冲溶液（PH:）+乙***
，用1000ml蒸馏水溶解，%,加入60ml乙***.混合均匀后,用超声波至少脱气30min 以上.
B：60%已***+40%的蒸馏水,混合均匀后至少脱气30min 以上.
梯度混合程序
Time(min)
A(%)
B(%)
0
85
15
20
75
25
29
45
55
30
0
100
35
Stop
色谱条件
色谱柱：CLC-ODS 150* 反相色谱柱.
柱温：40℃
流动相：A,B两溶液梯度混合。
流速：
荧光检测波长
激发波长：340nm
检测波长：455nm
进样量：10ul
色谱工作站: N2000-浙大
样品制备
,用去离子水溶解并定容至100ml的容量瓶中,摇匀,,,立即进样.
结果计算
茶氨酸含量(%)=
As:样品茶氨酸的峰面积
Ai:标准样品的峰面积
Wi:标准样品重量(g)
K: 标样的纯度.