文档介绍：复旦大学
硕士学位论文
托吡酯、亚低温对惊厥性脑损伤神经保护的实验研究
姓名:施亿赟
申请学位级别:硕士
专业:儿科学
指导教师:邵肖梅;王艺
20040501
托毗醋、亚低温对惊厥性脑损伤神经保护的实验研究
中文摘要
惊厥是小儿常见疾病,其发病率为,其中为反复发作性惊厥或惊
厥持续状态。针对惊厥反复发作或持续状态可导致脑损害,如何对惊厥性脑损
伤进行神经保护是目前临床急待解决的重要问题。本实验利用幼鼠毛果芸香碱惊
厥持续状态模型,观察惊厥后脑组织的病理变化并进一步探讨托毗酌、亚低温
和两者一联合干预对惊厥性脑损伤的保护作用。
第一部分幼鼠惊厥持续状态模型制备及病理改变
目的观察幼鼠毛果芸香碱惊厥持续状态模型海马损伤情况。方法复旦大
学实验动物部提供全部实验动物生后天雄性幼鼠、清洁
级,体重一随机分为惊厥持续状态模型组和正常对照组
幼鼠惊厥持续状态模型制备腹腔注射毛果芸香碱观察幼鼠行
为变化。腹腔注射同等剂量的生理盐水幼鼠作为对照观察并进行脑电监测、
病理染色、免疫组化和检测重点观察光镜下海马
区神经元和胶质细胞改变。结果毛果芸香碱惊厥持续状态模型鼠病
理损伤特点为神经元坏死、细胞凋亡、凋亡蛋白表达增多,胶质细胞增生。惊厥
持续状态组区坏死锥体细胞百分比为了士,较正常对照组士
明显增多区坏死锥体细胞百分比为,较正
常对照组明显增多惊厥持续状态组区单位面积
凋亡细胞数为士,较正常对照组明显增多单位面积
阳性面积较正常对照组明显增多,山增至
单位面积胶质细胞数由士正常对照组增至士惊
厥持续状态组毛果芸香碱惊厥持续状态鼠脑电变化惊厥后脑电
幅度增大,脑电频率增快。结论利用毛果芸香碱惊厥持续状态动物模型可以观
察到惊厥持续状态引起的海马神经元和神经胶质细胞病理改变,稳定、重复性好。
第二部分托毗对幼鼠惊厥持续状态脑损伤的神经保护
目的研究托毗醋对惊厥性脑损伤是否具有保护作用。方法毛果芸香碱
凉厥持续状态模型幼鼠随机分为托毗酷组和对照组托毗醋组为
模型幼鼠惊厥后腹腔注射托毗酷,每日一次,连续用药三天对
照组为惊厥后腹腔注射生理盐水,每日一次,连续用药三天检
测海马区神经兀坏死、凋亡、凋亡蛋白表达和胶质细胞增生变化情况。结果毛
果芸香碱惊厥持续状态模型鼠病理损伤特点为神经元坏死、细胞凋亡、凋亡蛋白
表达增多,胶质细胞增生。托毗酷组区坏死细胞百分比均较对照组低,
分别为山士降至士及降至士
托毗酷组区单位面积凋亡细胞数较对照组减少,由士
降至士托毗酷组单位面积阳性面积较对照组降
低,由降至托毗酷组单位面积胶质细胞数
较对照组降低,由士降至士。结论托毗酷减少
幼鼠惊厥性海马区细胞坏死、凋亡、凋亡蛋白表达和缓解胶质细胞增生。
第三部分亚低温对幼鼠惊厥持续状态脑损伤的神经保护
目的研究亚低温对惊厥性脑损伤是否具有保护作用。方法毛果芸香碱
惊厥持续状态动物模随机分为亚低温组和对照组。亚低温组为
将模型鼠惊厥后分钟放入低温箱内,每小时监测箱内温度,使之维持于
持续小时并进行肛温监测,使之维持于,至亚低温结束。对照
组为在室温下,不给予干预。检测海马区神经元坏死、凋亡、凋亡蛋白表达和胶
质细胞增生变化情况。结果毛果芸香碱惊厥持续状态模型鼠病理损伤特点为
神经元坏死、细胞凋亡、凋亡蛋白表达增多,胶质细胞增生。亚低温组海马
区坏死细胞百分比较对照组明显减少,分别为士降至士
士降至士亚低温组区单位面积
凋亡细胞数较对照组减少,由降至亚低温组单
位面积阳性面积较对照组表达减少,由士降至士
亚低温组单位面积胶质细胞数较对照组减少,由士降至
士。结论亚低温减少幼鼠凉厥性海马区细胞坏死、凋亡、凋一亡
蛋白表达和缓解胶质细胞增生。
第四部分托毗酷和亚低温联合干预对幼鼠惊厥持续状态脑损伤的神经保护
目的研究托毗醋和亚低温联合治疗对减轻惊厥持续状态引起的病理变化、
神经免疫组化和细胞凋亡等影响及与单一治疗的比较。方法干预方法同前,模
型幼鼠随机分为联合干预组和对照组并比较联合干预与单
于预间的差异。检测海马区神经元坏死、凋亡、凋亡蛋白表达和胶质细胞增生变
化情况。结果联合干预组海马区坏死细胞百分比均较对照组明显减
少,分别为由士降至士,山士降至
土联合干预组区单位面积凋亡细胞数较对照组降低,由
士降至士联合干预组单位面积阳性面积
较对照组表达减少,由士降至土联合干预组单
位面积胶质细胞数较对照组减少,由士降至士
对海马区锥体细胞,联合干预较亚低温十预能减少细胞坏死,有显著性
差异与托毗醋组相比,能较好减少细胞坏死对细胞凋
亡的影响中,联合治疗能更好减少区细胞凋亡,较托毗醋组,较亚
低温