文档介绍：微生物实验-细菌培养、接种
内 容
（录象）
（讲解示教）
3. 细菌接种法（一份/组）讲解
、物品中细菌检查（一份/组）讲解
、空气中细菌检查（一份/桌）讲解
-细菌培养、接种
内 容
（录象）
（讲解示教）
3. 细菌接种法（一份/组）讲解
、物品中细菌检查（一份/组）讲解
、空气中细菌检查（一份/桌）讲解
（讲解）
7. 第一次实验报告评讲
基础培养基的制备
去筋膜黄牛肉绞碎500g加入1000ml蒸馏水
直接煮沸2小时
调整酸碱度至pH
过滤，补足失水
重新校正pH一次
分装，高压灭菌，
15磅（℃）15～20分钟
检菌如无细菌生长
（液体透明）即可应用
脱脂纱布过滤，按比例加入1％蛋白胨、%
NaCl，%K2HPO4加热溶解补足水至1000ml
4℃浸泡过夜煮沸半小时
人体、物品中细菌检查
手
衣
发
钱
材料：普通平板 （1份/组）
盖上，标记 , 置 37℃，18-24h后观察。
飞沫、空气中细菌检查
材料：血平板 （1份/组）
距口15—20cm
用力咳嗽三次
置空气中
（避日光照射）
30分钟
飞 沫
空 气
盖上，标记 , 置 37℃，18-24h后观察。
结果观察——血平板
表皮葡萄球菌在血琼脂平板培养基上形成不溶血的菌落。
甲型溶血性链球菌形成的α溶血现象也称为甲型溶血现象或草绿色溶血现象，属于不完全溶血。
金黄色葡萄球菌形成的β溶血现象也称为乙型溶血现象，属于完全溶血。
细菌培养接种法——平板划线法
菌种：混合菌液
材料：普通平板
用具：接种环
方法：分区划线
1区
2区
3区
4区
原始区域
半固体培养基
斜面培养基
细菌培养接种法--斜面接种、液体接种、半固体
菌种：大肠杆菌或葡萄球菌斜面
材料：斜面、液体、半固体培养基
用具：接种环、接种针
液体培养基
结果观察——普通平板
普通琼脂平板培养基上，大肠埃希菌形成菌苔和菌落生长现象。
注意：大小、颜色、透明度、凸起度、表面干燥或湿润、光滑或粗糙、边缘是否整齐及血平板上的溶血情况。
***红（methyl red）实验
M - ***红（methyl red）实验
葡萄糖→***酸→乙酰***甲醇 ***红 -
葡萄糖→***酸 ***红 +
吲哚（indol）试验
I-吲哚（indol）试验
色氨酸→吲哚→玫瑰吲哚
↑
对二***氨基苯甲醛
枸橼酸盐利用试验
C -枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验
利用枸橼酸盐生长 +
不能利用 -
硫化氢试验
硫化氢试验（醋酸铅培养基）
某些细菌分解含硫氨基酸，生成H2S，H2S遇铁盐（如硫化亚铁、醋酸铅等），则形成黑褐色硫化铁（铅）沉淀物，而呈黑色为（＋）。
尿素酶试验
产生氨使培养基变碱， 指示剂显红色，为阳性。 如：变形杆菌为阳性。
IMViC试验
I - 吲哚（indol）试验
M - ***红（methyl red）试验
V - VP（Voges-Proskauer）试验
C -枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验
IMViC试验
I M Vi C试验
大肠埃希菌 + + - -
产气杆菌 - - + +
IMViC试验：
是吲哚、***红、V-P以及枸橼酸盐利用试验四者的合称。常用于肠道杆菌的鉴定。
实验小结
1、三类培养基
液体培养基——用于增菌；
均匀混浊、沉淀、表面生长
半固体培养基——观察动力；保存菌种（6个
月）；穿刺线，扩散生长
固体培养基——分离纯化；保存菌种（1个月）
菌落、菌苔
2、IMViC试验
第三次实验课内容
1、热力对细菌和芽胞的杀菌作用
2、紫外线的杀菌作用
3、常用化学消毒剂的杀菌作用和抗生素敏感试验
4、耐药性变异；
5、细菌的鞭毛变异；
6、高压灭菌器的使用；
7、细菌的鉴定