文档介绍：《生物化学》实验指导书
适用专业：生物科学、食品科学、生物工程、农学、园艺、中药、环境科学
长春科技学院生物食品系
含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，如乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量
(还原糖以葡萄糖含量计)。
还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的
3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖昔键需加入一分子水，。
三、实验材料、主要仪器和试剂
.实验材料小麦面粉(1000g)
(2)滤纸 (3)烧杯：100 mLX2
100 mLX 3 (6)刻度吸管：1mLX1;2 mLX2;
(9)漏斗 (10)天平 (11)分光光度计
100 mg,置于小烧杯中，加少量蒸储水溶解后，转
.主要仪器
(1)具塞玻璃刻度试管：20mLX11
(4)三角瓶：100mLX1(5)容量瓶:
10mLX1(7)恒温水浴锅(8)煤气炉
1mg/mL葡萄糖标准液
准确称取80C烘至恒重的分析纯葡萄糖
移到100mL容量瓶中，用蒸储水定容至100mL,混匀，4c冰箱中保存备用。
3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂
3,5—二硝基水杨酸(DNS)试剂：，溶解后移入1000mL
容量瓶中，加入2mol/L氢氧化钠溶液325mL,再加入45g丙三醇，摇匀，冷却后定容至1000mL。
(3)碘-碘化钾溶液：称取5g碘和10g碘化钾，溶于100mL蒸储水中。
（4）酚酗指示剂：，溶于250mL70%乙醇中。
6MHCl和6MNaOH各100mL。（%浓盐酸和24克NaOH定容至100mL）
四、操作步骤
.制作葡萄糖标准曲线
取7支20mL具塞刻度试管编号，按表1分别加入浓度为1mg/mL的葡萄糖标准液、蒸储水和3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂，配成不同葡萄糖含量的反应液。
表1葡萄糖标准曲线制作
管号
1mg/mL葡萄糖标准液
（mL）
蒸储水
葡萄糖含量
（mg）
光密度值
（OD540nm）
(mL)
DNS(mL)
0
0
2
0
1
2
3
4
5
6
将各管摇匀，在沸水浴中准确加热5min,取出，用冷水迅速冷却至室温，用蒸储水定容至