文档介绍：河科大二附院检验科
血液学一般检查
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概述 红细胞计数 血红蛋白测定 红细胞形态检查 血细胞比容测定 红细胞平均指数 红细胞体积分布宽度
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血液是由血细胞(二)血红蛋白的合成
(三)血红蛋白的代谢
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一)血红蛋白分子结构及成分
血红蛋白是珠蛋白与血红素相结合的球形大分子化合物。每个Hb分子含有4条珠蛋白肽链，每条折叠的珠蛋白肽链包裹（结合）一个亚铁血红素，形成具有四级空间结构的四聚体，即完整的Hb分子。只有这种四聚体结构才具有结合O2和CO2 的生理功能。
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珠蛋白具有种属特异性。每个珠蛋白分子含有两条α链和两条非α链（ β 、γ、 δ）。***为两条α链和两条β 链，胎儿为两条α链和两条γ链。 （δ链在胎儿和***期合成均较低）
亚铁血红素由2价铁原子和原卟啉Ⅸ组成
在正常状态，机体有99%Hb的铁原子呈Fe2+状态，称为还原Hb，l%的Fe3+为高铁血红蛋白，只有亚铁状态的Hb才能与氧结合，此时称氧合血红蛋白。血红素与氧分子的结合有协同效应。解离曲线呈S形。
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(二)血红蛋白的合成
影响Hb合成的激素有2种；一是红细胞生成素（EPO），可促进δ-氨基-γ***戊酸(ALA)的生成与铁的利用．从而促进血红素和Hb的合成；二是雄激素，睾***在肝脏内由5-β还原酶转变为5-β氢睾***，它能促进δ-氨基-γ***戊酸合成酶的生成。
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(三)血红蛋白的代谢
血红蛋白分子降解为珠蛋白和血红素．血红 素中大部分铁由单核-吞噬细胞系统细胞加工处理后，再重新回到循环血液中，与运铁蛋白结合进入铁代谢库。珠蛋白由一系列蛋白酶和肽酶作用分解为氨基酸组分(内源性氨基酸)，与外源性氨基醒混在一起，进入氨基酸代谢，可再参与合成蛋白质和多肽或转变成其他含氮物质。
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检测原理
1．***化高铁血红蛋白(HiCN)测定法
2．其他测定法
有十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS-Hb）法、叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法、碱羟血红蛋白法、 沙利(Sahli)酸化血红蛋白法、溴代十六烷基三甲***血红蛋白测定法（CTAB）等
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1．***化高铁血红蛋白(HiCN)测定法 血液中，除了硫化血红蛋白外各种血红蛋白均可被高铁***化钾氧化为高铁血红蛋白，再和CN-结合生成稳定的棕红色复合物***化高铁血红蛋白。***化高铁血红蛋白在540nm处有一吸收波峰，用分光光度计测定该处的吸光度，再换算成每升血液中的血红蛋白浓度，或制备标准曲线供查阅。
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将标本稀释251倍，Hb的摩尔消光系数为44000（mmol•cm），分子量为64458，540nm波长比色得吸光度值A。比色杯光径
为1cm。血红蛋白浓度计算公式：
Hb(g/L)=Aג540HiCNX64458/44000X251
=
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方法学评价
Hb测定方法大致分为4大类：
①根据Hb分子组成测定总Hb法(全血铁法)。
②根据血液物理特性测定Hb(比重法、折射仪法)。
③根据Hb与O2可逆性结合的物性测Hb(血气分析法)。
④根据Hb衍生物光谱特点 定量测定Hb（最常用）。
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方法
优点
缺点
HiCN
操作简便、快速(5min)，结果稳定可靠， 试剂容易保存，便于质控，为参考方法
①KCN有剧毒
②高白细胞和高球蛋白可致浑浊。
③HbCO转化慢
SDS-Hb
十二烷基硫酸钠血红蛋白
不用剧毒试剂、无公害，操作简便，呈色稳定，准确度和精度高
①SDS-Hb消光系数未确定
②SDS质量差异性大。
③SDS溶血活力大，不适于同时进行自动化分析
AHD575
同HiCN法，不用剧毒试剂
不便于自动检测、***化血红素纯度达不到标准
HiN3
准确度和精密度高，试剂毒性低
HbCO转化慢
CTAB
溶血活力强，但不破坏白细胞，适合自动化分析
精密度和准确性低
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质量控制
1. 血标本 采血顺利、高脂血症、高球蛋白血症、高白细胞
2. 方法 HiCN测定为WHO和ICSH推荐的参考方法 十二烷基月桂酰硫酸钠法结果稳定可靠，准确，以用于部分C