文档介绍：1、基因工程制药的主要步骤
（1）从供体细胞中分离出基因DNA，用限制性核酸内切酶分别将外源DNA和载体分子切开
（2）用DNA连接酶将含有目的基因的DNA片段接到载体分子上，形成重组的DNA分子
（3）将人工重组的DNA分子导入它们
指通过一定的技术，将提纯化的酶制剂固定或限制在一定的相对密闭空间里，使之不但能够连续地进行反应，而且反应后的酶又可以反复使用
（2）制定固定化酶的方法
A、载体结合法
物理吸附法（利用载体内外表面性质，将酶吸附）
离子结合法（通过离子键结合酶与载体交联的固定法）
共价结合法（通过共价键结合酶与载体固定方法）
B、交联法
利用双功能或多功能试剂，直接与细胞表面的各种反应基团反应，使其彼此共价交联形成网状结构，从而固定细胞
C、包埋法
将微生物细胞包埋在凝胶内部的微孔内或埋于由半透膜聚合物形成的超滤膜内，有凝胶包埋法和半透膜包埋法两类
17、基因工程抗体的优点
（1）通过基因工程技术的改进，可以最大程度降低抗体的鼠源性，降低甚至消除人体对抗体的排斥反应
（2）基因工程抗体的分子小，穿透力强，更易到达病灶的核心部位
18、基因工程抗体的种类
（1）人-鼠嵌合抗体（2）双功能抗体（3）改型抗体（4）小分子抗体（5）多功能抗体
19、（1）什么是基因芯片
是将大量的分子识别基因探针固定在一种微小基片上，与被检测的标记的核算样品进行杂交，通过检测每个探头分子的杂交强度进而获取大量基因序列信息的微型器件
（2）基因芯片的原理
利用核酸分子杂交原理对未知样品进行检测
（3）过程
a芯片的设计与制备 b待测基因的标记 c基片的杂交 d杂交信息的检测与分析
20、什么是基因治疗
是将人的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞，以纠正基因的缺陷或发挥治疗作用，从而达到治疗疾病作用
21同尾酶与限制性内切酶的区别
同尾酶：识别的序列不同，但能切出相同的粘性末端
限制酶：识别DNA链特定的核苷酸序列，并能切割
22、原生质体的培养方法
（1）固体培养（2）液体培养（3）固液双层培养（4）看护培养
23（1）温度对发酵的影响
影响菌体内酶活，影响发酵液的理化性质
（2）影响温度变化的因素
生物热，摩擦热，蒸发热或显热，辐射热
24、培养法的操作步骤，特点和利用价值
（1）看护培养法：愈伤组织→单cell
（2）微室培养：便于观察细胞的分裂
（3）平板培养:单细胞直接接种于固体培养基
（4）条件培养：培养过植物细胞的培养液+含单细胞平板
（5）悬浮培养：植物细胞悬浮于培养液
25、酶制剂的分离制备过程
（1）材料的选择和预处理
（2）细胞的破碎
（3）有效成分的抽取
（4）纯化精制
（5）浓缩、冻干及保存
酶制剂分离纯化需注意:
应尽量在低温下进行
酶在酸/碱性下不稳定，需控制纯化工作系统的PH
制备时所采用的缓冲体系宜包括一定浓度的盐，易提高蛋白质的浓度
操作过程中需避免泡沫的产生
纯化过程中需要避免由重金属、有机溶剂、微生物污染等造成的酶变性失活
26、什么是基因组计划，目的及意义
基因组计划：阐明人类基因组30亿个碱基对的序列，发现所有人类基因并阐明其在染色体上的位置，进而破译人类全部遗传信息的全球范围内的科学计划
目的