文档介绍：实验二凝集试验一、目的要求?理解凝集反应的基本原理; ?掌握玻片凝集反应的操作技术与结果判定; ?掌握试管凝集反应的操作技术与结果判定。二、凝集反应的原理通常,细菌和红细胞等颗粒性抗原在悬液中带弱负电荷, 在悬液中相互排斥而呈均匀的分散状态。凝集试验的发生分两阶段,当特异抗体与相应抗原颗粒相遇时, 发生特异性的结合形成抗原抗体复合物,降低了抗原分子间的静电排斥力。第二步在电解质的参与下进一步中和复合物外层的电荷,从而聚集成较大的凝集块。凝集反应的类型两大类直接凝集试验间接凝集试验玻片法:定性试管法:定量乳胶凝集试验碳素凝集试验间接血凝试验三、实验材料 1. 玻板凝集试验(1)玻片、移液枪、牙签等; (2)布氏杆菌平板凝集抗原、布氏杆菌标准阳性血清和阴性血清(3)待被检血清 2. 试管凝集试验(1)试管( 1 ㎝× 8 ㎝)、试管架、恒温箱、各规格移液枪等; (2)布氏杆菌试管凝集抗原及布氏杆菌阳性血清、阴性血清; (3)待被检血清; (4)灭菌 % 石碳酸生理盐水。四、操作方法 1. 玻板凝集试验(1)在洁净玻片上,各加 15-20ul 布氏杆菌阳性血清、阴性血清、待检血清与生理盐水。(2)加入布氏杆菌平板抗原 15-20ul ,滴在血清附近,不与血清接触。用牙签将血清与抗原混匀,轻轻摇动玻板使液滴呈旋状运动。(3)结果判定: ?出现颗粒状或块状凝集者为阳性反应; ?未出现凝集者为阴性反应。阴性血清阳性血清生理盐水待检血清 2. 试管凝集试验(1)取试管八支,按下表加入生理盐水; (2)取布氏杆菌血清进行梯度稀释; (3)加入布氏杆菌检测抗原; (4)充分混匀,置 37 ℃温箱 24 小时。 (ml ) 3 . 结果判定: 4. 判定标准: ?出现“++ ”以上的凝集现象的最高血清稀释度为血清的凝集价?牛、马和骆驼于 1: 100 稀释度,猪、山羊和犬于 1: 50 稀释度出现“++ ”以上凝集现象时, 被检血清应判定为阳性反应。牛、马和骆驼于 1: 50 ,猪、养和犬于 1: 25 稀释度出现“++ ”以上凝集现象时,应判为可疑反应。五、结果判定? ……. ? …….