文档介绍：试剂的配制方法: 高渗溶液 磷酸缓冲液() , 20mmol/LMgC1 2, 蔗糖。 醋酸一醋酸钠缓冲液() 甲液: 准确称取 · 3H 2 O(Mr=) 在 200mL 烧杯中,蒸馏水溶解并定容至 IL 配制成 的 NaAc 溶液。乙液: 移液枪精确量取 冰乙酸(%) ,定容到 1000mL ,配制成 的 NaAc 一 HAc 溶液。待用时, 量取 410mL 乙液与 590mL 甲液混合配制成 pH= 的 的 HAc 一 NaAc 缓冲溶液 1000mL 。 试剂甲液:NaOH104g 溶于 1300mL 蒸馏水中。乙液:3,5 一二硝基水杨酸 30g 加入甲液中混匀,加热溶解。丙液: 酒石酸钾钠 910g 溶于 2500mL 蒸馏水中。丁液:25g 重蒸酚,加 25g 无水亚硫酸钠,加入丙液中。将以上各步骤的溶液混合,加入 1200mL 蒸馏水( 总体积 5000mL) ,放在棕色瓶中, 暗处放置一周后即可使用。 1%CMC 一 Na 溶液称取 C一Na于 100m L 烧杯中,加入20一 40mL 、 、 pH4. 8的 HA c一 NaAc 缓冲液,加热溶解,转移到 100mL 容量瓶定容, 4 oC 冰箱保存,保存期 l一2 周。 1% 水杨苷溶液称取 一水杨苷(D一 saliein) 于 100mL 烧杯中,加入适量的 、 的 HAc 一 NaAc 缓冲液,加热溶解,转移到 100mL 容量瓶定容, 4 。C 冰箱保存,保存期 l 一2 周。试验操作方法: l) 葡萄糖标准曲线的绘制准确称取 分析纯的无水葡萄糖( 预先在 105 ℃干燥 3一 4h 至衡重) ,用少量蒸馏水溶解后,定量转移到 100mL 容量瓶中,再定容到刻度,摇匀,浓度为 l mg/mL 。取8 根试管,从 0一7 编号,分别加入 0、 、 、 、 、 、 与 l mg/mL 的葡萄糖溶液,共 8 个处理。每管加入 DNS 试剂 2mL ,置于沸水中,水浴 10min ,再冰浴冷却,以蒸馏水定容到 10mL ,混匀,于 540nm 测定 OD 值。以 OD540 一葡萄糖含量作图,得到葡萄糖的标准曲线,线性回归得到扩=> ,线性效果较好(2) 滤纸酶活(FPA) 的测定滤纸酶活代表了纤维素酶的三种酶组分协同作用后的总酶活。即内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β一葡萄糖苷酶所组成的复合酶系的协同水解纤维素的能力, 是该菌株整个纤维素酶系的酶活力水平的综合体现。滤纸酶活单位定义为: 以滤纸为底物,在一定条件下(pH ;50 ℃恒温 lh) ,以 1mL 纤维素酶液 1min 催化水解纤维素生成 1u mol 的葡萄糖为 1 个滤纸酶活单位,以 IU 表示。将 lx6cm()( 定量滤纸直径 ) 折叠放入试管底