文档介绍：基因组DNA提取与PCR扩增技术一、基因组DNA提取实验目的基因组DNA的制备是基因分析的前提。
本实验要求掌握基因组DNA提取的基本方法。
实验原理
DNA在生物体内是与蛋白质形成复合物的形式存在的。核酸与蛋白质之间的结合力包括离子基因组DNA提取与PCR扩增技术一、基因组DNA提取实验目的基因组DNA的制备是基因分析的前提。
本实验要求掌握基因组DNA提取的基本方法。
实验原理
DNA在生物体内是与蛋白质形成复合物的形式存在的。核酸与蛋白质之间的结合力包括离子键、氢键、范德华力等，破坏或降低这些结合力就可把核酸与蛋白分开。
DNA、RNA所含有的嘌呤环和嘧啶环的共轭双键具有吸收紫外光的性质，吸收高峰在260nm处，所以，可用紫外分光光度法测定DNA的浓度。
基因组DNA提取试剂盒：在高盐的状态下，DNA纯化树脂专一性地吸附DNA；而在低盐或水溶液状态下，DNA被洗脱下来。
器材与试剂台式高速离心机、天平、水浴恒温箱、移液枪、塑料离心管等试剂盒（纯化树脂、GN结合液、漂洗液、无水乙醇、离心纯化柱）、TE缓冲液操作
1、将全血轻轻混匀，，5000r/min离心×1ml纯化树脂中，颠倒混匀3sec；5-6次，室温，3min。
2、取沉淀，加1mlGN结合液悬浮沉淀，颠倒混匀，5000r/min离心×3sec；3、取沉淀，，颠倒混匀，5000r/min离心×3ecs；4、取沉淀，，颠倒混匀；装入离心纯化柱，12000r/min心×1min，弃乙醇液；离
5、空柱再12000r/min离心×1min，进一步弃乙醇液；6、，加入100ulTE缓冲液于纯化树脂上（不能粘在管壁上），室温下放置3min，12000r/min离心×2min。
注意事项一般情况下，纯净的DNAOD260/，。若样品中含蛋白质，则比值下降，必要时需重新抽提。若DNA的比值<，%；从核酸中去除蛋白质时，常用到酚：***仿等体积混合液。***仿的作用是使蛋白质变性并有助于水相和有机相的分离；
DNA用TE溶解，可增加DNA的稳定性，便于长期保存。
二、PCR扩增技术
实验目的
本实验以所提出的全血基因组924bp的扩增产物。学****并掌握DNAPCR为模板，以线粒体基因上一段核苷酸为引物，扩增出反应的基本原理与实验技术。
实验原理多聚酶链反应（PCR）技术的原理类似于DNA的天然复制过程。可简述为：
在微量离心管中加入适量缓冲液，加入微量模板DNA，四种脱氧核苷酸（dNTP），和2+加热使模板DNA在高温下（94℃）变性，双链解链，这是所谓变性阶段。
降低溶液温度，使合成引物在低温（56℃）与模板DNA互补退火形成部分双链，这是所谓退火阶段。
溶液反应温度升至中温（72℃），在Taq酶作用下，以四种dNTP为原料，引物为复制
起点，模板DNA的一条双链在解链和退火之后延伸为两条双链，这是延伸阶段。
如此反复，在同一反应体系中可重复高温变性、低温复性和DNA合成这一循环，使产物DNA重复合成，并且在重复过程中，前一循环的产物DNA可作