文档介绍:组培苗生产(试管植物) 2-1 植物组织培养的过程组培生物反应器植物组织培养快速繁殖的基本流程:(1 )材料采集和处理 Collect and manage materials 材料的选择:一般采用茎尖、根尖、幼嫩部位。木本花卉:阔叶树 1-2 年生的枝条,针叶多采种子内子叶或胚轴。草本多采集茎尖。切取生长点位置的外植体(一般 毫米左右) (2 )材料的消毒 Sterilize the materials 自来水清洗-蒸馏水冲洗-吸干-消毒刀片切成小块; 无菌环境放入酒精( ethanol ) 浸泡 30-60s; 漂白粉饱和溶液( Javel water-NaClO ) 或氯化汞( HgCl 2) 溶液消毒 10min; 取出用无菌水( sterile water ) 冲洗 3-4 次。(3 )制备外植体 Prepare the explants 在无菌环境下,将已消毒的材料用无菌刀,剪, 镊等剥去芽的鳞片, 嫩枝的外皮或种皮胚乳; 切成 - 厚的小片。(4 )接种生长点外植体 Inoculate the explants 无菌条件下,将切好的外植体立即接种在合适培养基上,封口,保持一定温度,培养。(5 )诱导愈伤组织 Induce the form of callus 将获得的材料转入增殖分化培养基中继代培养长成侧芽或不定芽(胚状体) ,一般 1 个月左右。(6 )芽球增殖 Mutiplicate of gemmmule 转入生根培养基中培养, 1 个月左右生根,发育成完整植株。(7 )长成完整植株 Grow into intact plant 分株分瓶(8 )扩充多个子瓶培养 Expland culture muti-bottles (9 )炼苗、移栽 Exercise sprout and transplant 将培养容器打开,室内自然条件下适应一段时间。取出试管苗,移栽到合适基质中。一段时间后,移栽到大田土壤中。定义: (一般) 组织培养泛指细胞、组织和器官在适当的培养条件下离体生长的技术。 Tissue culture---the technology of anized growth (in vitro) for cell 、 tissue and apparatus under proper culture conditions. (严格) 组织培养是指从机体内取出组织或细胞,模拟机体内生理条件,在体外进行培养,使之生存或生长成组织。 Tissue culture :The tissue or cells removalled from the body and physiological conditions in vivo simulated. Cultured in vitro and then make live or grow into tissues. 细胞培养: 细胞培养是指动植物细胞在体外条件下的存活或生长,此时细胞不再形成组织。 cell culture: Animal and plant cells under in vitro conditions survival or growth. Cells no longer grow to apparatus anism. 植物组织培养的方法: Plant culture 植株培养 Embryo Culture 胚胎培养( 组织): 植物胚胎培养是指对植物的胚( 种胚) 及胚器官(如子房、胚珠)进行人工离体无菌培养,使其发育成幼苗的技术。 Apparatus culture 器官培养:利用植物的根、茎、叶、花药、子房、胚珠、胚等, 无菌离体培养成幼苗。植物组织大规模培养特点: * 培养条件可以人为控制( 便于稳定地进行周年培养生产) Culture conditions be controlled easy * 生长周期短,繁殖率高( 不同要求而提供不同的培养条件,生长较快。) Growth periods shorter and reproduce rate higher * 管理方便,利于工厂化生产和自动化控制 Easy to manage, convenient for factory produce and robotization control 植物组织培养存在的问题: * 对于培养比较困难的植物组织培养缺乏研究。许多有意义的杂交亲本或组合还不能有效培养成功。 Lack of research in tissue culture for difficult to cultivate plants. * 对于植物细胞全能性表达和激素作用机理等尚未开展深入研究 The plant cell totipotency