文档介绍：关于实验五血清中谷丙转氨酶的测定
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一、实验目的
掌握血清丙氨酸氨基转移酶活性测定的基本原理。
了解血清丙氨酸氨基转移酶的测定方法及临床意义。
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510nm
光吸收法关于实验五血清中谷丙转氨酶的测定
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一、实验目的
掌握血清丙氨酸氨基转移酶活性测定的基本原理。
了解血清丙氨酸氨基转移酶的测定方法及临床意义。
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510nm
光吸收法测定
相对血清ALT活力
二、实验原理
丙氨酸氨基转移酶(ALT)催化丙氨酸与α-酮戊二酸生成丙酮酸和谷氨酸。丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼在酸性溶液中反应形成相应的2,4-二硝基苯腙，呈黄色，后者在碱性条件下呈红棕色。
（1）丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+谷氨酸
ALT
（2）丙酮酸+2,4-二硝基苯肼
丙酮酸2,4-二硝基苯肼(黄色)
丙酮酸2,4-二硝基苯肼
（3）
苯腙硝醌化合物
NaOH
（黄色）
（红棕色）
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三、实验器材
材料：人血清
试剂：谷丙转氨酶测定试剂盒
用具：分光光度计，微量移液枪，试管，试管架，恒温水浴锅
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（1）取3支试管，按下表加入试剂:
试剂
试剂空白管
标准管
样品管
基质液(uL)
200
200
200
标准液(uL)
–

–
血清样品(uL)
–
–

蒸馏水(uL)

–
–
混合37℃水浴放置30min
显色剂(uL)
200
200
200
37℃水浴放置20min
稀释NaOH(uL)
2000
2000
2000
四、实验步骤
冷却至室温后，510nm处比色
比色方法：以空白管调零，读取标准管及样品管光密度值。