ctab法提取dna.docx

文档介绍：试剂：
1）2×CTAB 提取液（PH ）：2% CTAB，，，-cl，%巯基乙醇。即称取CTAB 2 g加蒸馏水40ml，加1M Tris-cl（）10ml，：
1）2×CTAB 提取液（PH ）：2% CTAB，，，-cl，%巯基乙醇。即称取CTAB 2 g加蒸馏水40ml，加1M Tris-cl（）10ml， EDTA（PH ）4ml和5M NaCl 28ml,待CTAB溶解后用蒸馏水定容到100ml（提取前加入2%的巯基乙醇，）
2）1M Tris-cl（PH ）100 ml: Tris碱；ddH2O ，80ml；HCl， ml三者混匀充分溶解后，，定容至100ml
3） EDTA（PH ） 100ml： ，（约2gNaOH颗粒），定容至100ml
4）5M NaCl 100ml： NaCl ，用ddH2O定容到100ml
5）3M NaAc 10ml： NaAc，用ddH2O定容到10ml
操作步骤：
，在研钵中加入液氮预冷，将叶片放到液氮中研磨均匀，直至全部研磨至粉末，，加入600 ul 65℃预热的CTAB溶液（用前加入2%的巯基乙醇）
将装有CTAB和样品的EP管放入65℃水浴，约1h
冷却后，加入600ul 的酚：***仿：异戊醇(25:24:1=300:288:12