文档介绍:关于白细胞计数
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1、目的:掌握显微镜法白细胞计数的原理
及方法。
2、原理:用白细胞稀释液将血液稀释一定 关于白细胞计数
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1、目的:掌握显微镜法白细胞计数的原理
及方法。
2、原理:用白细胞稀释液将血液稀释一定 倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血 液注入血细胞计数板,在显微镜下计数一定体积的白细胞数,经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。
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3、器材:显微镜、改良牛鲍计数板、试管、吸管、微量吸管、吸头等。
4、试剂:白细胞稀释液:2%冰乙酸2ml, 10g/L结晶紫(或亚甲蓝)3滴,加蒸馏水到100ml。
5、标本:新鲜
全血或末梢血。
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改良的牛鲍
计数板。
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操作步骤
1、加稀释液:用吸管吸取白细胞稀释液
。
2、吸取血液:用微量吸管吸取新鲜全血或
末梢血20ul,擦去管尖外部
余血。将吸管插入试管中白
细胞稀释液的底部,轻轻放
出血液,并吸取上层白细胞
稀释液清洗吸管2-3次。
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3、混匀:将试管中血液与稀释液混匀,待
细胞悬液完全变为棕褐色。
4、充池:再次将小试管中的细胞悬液混
匀,用微量吸管吸取7ul左右充
入改良牛鲍计数板的计数池中,
室温静置2-3分钟,待白细胞完
全下沉。
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5、计数:在低倍镜下计数四角4
个大方格的白细胞总数。
6、计算:
WBC=N/4×10×20×106=N/20×109
其中N为4个大方格的白细胞总数。
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7、细胞计数原则
大方格四边压线细胞数左不数右,数上不数下,
弓形移动
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8、考核评价
a. 常规考核标准 (RCS)
RCS= ×100%
评价: 白细胞≤ ×109/L者, RCS<30%
白细胞在(-)×109/L者 RCS<20%
白细胞≥ ×109/L者 RCS<15%
超过上述标准者为不合格
b. 其他方法
四大格所见白细胞最大值—最小值
四大格所见白细胞数平均值
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注意事项
(1).稀释液密封保存,防止污染,小试管、计数板、盖片均须清洁,以免杂质、微粒等被误认为细胞。
(2).采血时针刺深度必须适当,不能过度挤压,防止组织液渗入或采血时间太长引起血液凝固。
(3).稀释液和采血量要准确,充分混匀,充液适量,无不足、外溢和气泡,细胞分布均匀。
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(4).白细胞总数在参考范围内,大方格间的细胞数不得相差10个以上,两次重复计数误差不得超过10%。
(5).白细胞数量过高时,可加大稀释倍数,白细胞数量过低时,可计数8个大方格的白细胞数或取双倍血量。
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(6).一些贫血患者血液中有核红细胞增多,会计数在白细胞总数内,应校正。
校正公式:白细胞校正数/L=M×(100/100+N)
M为未校正前白细胞数,N为在白细胞分类时,计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞数。
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