文档介绍:ABO血型试验(正反定型)
一 原理
利用红细胞凝集试验,通过正反定型准确鉴定 ABO血型
二试剂和材料
.抗-A (B型血),抗-B (A型血)及抗-A+B (O型血)分型血清
. 5%A、B及。型试剂红细胞盐水悬液。
.受检ABO血型试验(正反定型)
一 原理
利用红细胞凝集试验,通过正反定型准确鉴定 ABO血型
二试剂和材料
.抗-A (B型血),抗-B (A型血)及抗-A+B (O型血)分型血清
. 5%A、B及。型试剂红细胞盐水悬液。
.受检者血清o
.受检者5%红细胞盐水悬液。
三操作(玻片法)
.取清洁玻片一张,用蜡笔划成方格,标明抗-A、抗-B和抗-A+B,分别用滴 管滴加抗-A、抗-B和抗-A+B分型血清1滴于方格内,再加受检者2%红细 胞悬液1滴,混合。
.另取清洁玻片一张,用蜡笔划成方格,标明 A细胞、B细胞和O细胞,用 滴管各加受检者血清1滴,再分别用滴管加A、B和。型试剂红细胞悬液 1滴。
.将玻片轻轻转动,使血清与细胞充分混匀,连续约 15min,以肉眼观察有 无凝集反应。也可用低倍镜观察结果。
四 结果判定:见表1
表1 ABO血型正反定型结果
分型血清+受检者红细胞
受检者
受检者血清+试剂红细胞
抗-A抗-B抗A+B
血型
A细胞B细胞O细胞
+
一
+
A
一
+
一
一
+
+
B
+
——
一
一
一
一
O
+
+
一
+
+
+
AB
一
一
一
注:+ =凝集;-=不凝集
五注意事项
.试管、滴管和玻片必需清洁干燥,防止溶血。
.操作中应先加血清后加红细胞悬液,以便容易核实是否漏加血清
.为防止冷凝集现象的干扰,一般在室温内进行试验
4.标准抗血清必须符合标准,不要长期放在室温,以免污染和孳长细菌,等渗
生理盐水必须等渗、新鲜、无微生物孳生。
5.观察结果要仔细,微弱凝集、或肉眼观察未凝集的标本,要用显微镜观察。
注意特异性凝集与继发性血液凝固、串钱状形成和异物的区别。
六 血型鉴定中常见的假阳性反应
1.红细胞串钱形成:红细胞相互重叠,连接成串,象一串重叠的钱币,称为串
钱形成,又称假凝集。可见于血浆蛋白紊乱、血沉加快的各种病例或实验中
温度过高,作用时间过长,致水分蒸发,血清浓缩。可在观察结果前,再加
等渗盐水 1 滴,彻底混匀,串钱状红细胞因血液稀释而散开。也可用高倍镜
仔细观察凝集块的形态和用洗涤后和红细胞配制悬液。
2.寒冷凝集: 在较低温度出现的凝集称为寒冷凝集。多数正常人的血清在0~2oC
时能凝集本人的红细胞,又称自家凝集。这种凝集是可逆的,在0-2 oC 时作
用最强,20oC 时可消失。但在支原体肺炎、自免溶贫、肝硬化、系统性红斑
狼疮等患者血清中,可以出现高效价的病理性自身冷凝集抗体,能与本人及
其它各型人的红细胞发生凝集。其最适反应温度是低温,一般在 25-30OC凝 集作用即减弱。克服方法:被检红细胞在配制悬液前,先用37oC等渗生理盐 水洗涤,必要时试验操作可在 37oC条件下进行,或在37oC水浴中反复观察 几次,报告时要注明有寒冷凝集现象。
七 血型鉴定中常见的假阴性反应
标准血清效价太低亲和力不强 : 抗血清保存方法不当