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实验二凝集反应.ppt

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实验二凝集反应.ppt

文档介绍

文档介绍:实验二凝集反应
试管凝集反应示意图
肥达氏反应----用已知伤寒菌的H(鞭毛)和O(菌体)以及甲型(A)与乙型(B)副伤寒沙门氏菌的标准液与病人血清做凝集试验,用于伤寒副伤寒的辅助诊断或用于流行病学调查的免疫凝集实验。
Zhang实验二凝集反应
试管凝集反应示意图
肥达氏反应----用已知伤寒菌的H(鞭毛)和O(菌体)以及甲型(A)与乙型(B)副伤寒沙门氏菌的标准液与病人血清做凝集试验,用于伤寒副伤寒的辅助诊断或用于流行病学调查的免疫凝集实验。
Zhang Qiuyu
Zhang Qiuyu
Zhang Qiuyu
Zhang Qiuyu
人的红细胞表面有20几种血型抗原系统
ABO血型系统是第一个被描述的红细胞血型系统,由Landsteiner于1901年提出:
血型
A
B
AB
O
红细胞上的凝集原(抗原)
A
B
A和B
无抗原
血型鉴定的原理
根据红细胞上所含抗原种类将人类血型分为如下血型:
ABO血型系统中有两种抗原,分别称为A抗原和B抗原,均存在于红细胞膜的外表面。
Zhang Qiuyu
1. 抗原本质:血型抗原是镶嵌于红细胞膜上的糖蛋白与糖脂,ABO抗原特异性是在H抗原基础上形成的
Zhang Qiuyu
2. 抗体本质:
血浆中存在两种相应的抗体即抗A抗体和抗B抗体
血型
A
B
AB
O
红细胞上的凝集原(抗原)
A
B
A和B
无抗原
血清中的凝集素(抗体)
抗B
抗A
无抗体
抗A和抗B
☆ABO血型系统的抗体为天然抗体,主要为IgM,不能通过胎盘。
Zhang Qiuyu
Zhang Qiuyu
Zhang Qiuyu
如果交叉配血试验的两侧都没有凝集反应,为配血相合, 可以进行输血;
如果主侧有凝集反应,则为配血不合,不能输血;
如果主侧不引起凝集反应,而次侧有凝集反应,只能在应急情况下输血,输血时不宜太快太多(<300ml),并密切观察,如发生输血反应,应立即停止输注。
Zhang Qiuyu
Zhang Qiuyu
载玻片 1块/每人 **用完各自用水冲洗净置消毒缸
三棱针 1根/每人 用后弃垃圾斗
棉签 根/每人(先取再取1) 用后弃垃圾斗
牙签 1根/每人(两端使用) 用后弃垃圾斗
碘伏
生理盐水试管
试管架
标记笔
实验材料
Zhang Qiuyu
操作步骤
i. 取血:搓揉左手无名指的指腹——碘伏消毒——用三棱针刺1-2滴血——将无名指的指腹封住盛有盐水的试管管口,用倾倒法将血滴洗入盐水中并混匀形成1%的血球悬液。
ii. 鉴定:取洁净玻片一块,用标记笔在中央划线分区,标明“A”、“B”区——在“A”、“B”区分别滴加抗A、抗B血清各1滴——用毛细吸管吸取待检的血球悬液滴入抗A、抗B血清中,用牙签两端分别拌匀——将玻片平持手中,前后左右转动使之充分混匀,室温放置10-15分钟后观察结果。
Zhang Qiuyu
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注意事项
取血时,注意无菌操作,避免HBsAg的交叉污染(*HBsAg携带者);
刺血时,尽可能一次性成功,用力适当,让血自然流出或搓揉后流出为佳,勿强行挤压。
鉴定时,滴1滴抗血清及血球悬液即可,多则两边易混;牙签两头不可混用;
O型血无凝集现象,无须反复检测。
Zhang Qiuyu
血型
抗B血清
抗A血清
O
_
_
A
_
+
B
+
_
AB
+
+
结果判断
Zhang Qiuyu
ABO血型的遗传规律
?父母血型分别为A型、B型,他们子女的血型可能是何种?
?父母分别为A型和O型,子女有无可能是B型
〖思考〗
Zhang Qiuyu
三、E-花结形成实验
原理
人的外周血T淋巴细胞上特有能与绵羊红细胞结合的受体,称E受体;在一定实验条件下,绵羊红细胞与该受体结合形成以T细胞为中心,四周绕以绵羊红细胞的玫瑰花团,故称E花结实验。
E受体与CD2分子、LFA-2(淋巴细胞功能相关抗原)为同一物质。
Zhang Qiuyu
花结分类:
Ea-RFC(效应T细胞):正常值为15-35%。
E-RFC(总和):正常值为60-80%。
意义:
①   用于检测患者外周血中T细胞的比例及数目,间接反映患者细胞免疫功能。
②  E-受体为T细胞所特有,是鉴定T细胞的重要标志之一,还用于T细胞的分离。
Zhang Qiuyu