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气相色谱仪和液相色谱仪的使用.ppt

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气相色谱仪和液相色谱仪的使用.ppt

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气相色谱仪和液相色谱仪的使用.ppt

文档介绍

文档介绍:气相色谱仪和液相色谱仪的使用
Speaker:
适用于公司介绍/新品发布/融资宣讲/商务路演

(1)分离效率高:
复杂混合物,有机同系物、异构体。手性异构体。
(2) 灵敏度高:
可以检测出μg气相色谱仪和液相色谱仪的使用
Speaker:
适用于公司介绍/新品发布/融资宣讲/商务路演

(1)分离效率高:
复杂混合物,有机同系物、异构体。手性异构体。
(2) 灵敏度高:
-1(10-6)-1(10-9)级的物质量.
(3) 分析速度快:
一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。
(4) 应用范围广:
适用于沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。
不足之处:
不适用于高沸点、难挥发、热不稳定物质的分析。
被分离组分的定性较为困难。
二、气相色谱分离过程
气相色谱分离过程是在色谱柱内完成的。
填充柱色谱: 气固色谱和气液色谱,两者的分离机理不同。
气固色谱的固定相: 多孔性的固体吸附剂颗粒。
固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同。
气液色谱的固定相: 由 担体和固定液所组成。
固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。
气固色谱的分离机理:
吸附与脱附的不断重复过程;
气液色谱的分离机理:
气液两相间的反复多次分配过程。
气相色谱分离过程
当试样由载气携带进入色谱柱与固定相接触时,被固定相溶解或吸附。
随着载气的不断通入,被溶解或吸附的组分又从固定相中挥发或脱附,
挥发或脱附下的组分随着载气向前移动时又再次被固定相溶解或吸附。
随着载气的流动,溶解、挥发,或吸附、脱附的过程反复地进行。
分配系数 K
组分在固定相和流动相间发生的吸附、脱附,或溶解、挥发的过程叫做分配过程。在一定温度下,组分在两相间分配达到平衡时的浓度(单位:g / mL)比,称为分配系数,用K 表示,即:
分配系数 K的讨论
一定温度下,组分的分配系数K越大,出峰越慢;
试样一定时,K主要取决于固定相性质;
每个组份在各种固定相上的分配系数K不同;
选择适宜的固定相可改善分离效果;
试样中的各组分具有不同的K值是分离的基础;
某组分的K = 0时,即不被固定相保留,最先流出。
液相色谱仪(1)
液相色谱仪(2)
液相色谱仪(3)
液相色谱仪(4)
一、高效液相色谱法的特点
特点:高压、高效、高速
高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。
二、流程及主要部件


(1) 高压输液泵
主要部件之一,压力:150~350×105 Pa。
为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相(<10μm),液体的流动相高速通过时,将产生很高的压力,因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。
应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性
(2) 梯度淋洗装置
外梯度:
利用两台高压输液泵,将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室,混合后进入色谱柱。
内梯度:
一台高压泵, 通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。
(3) 进样装置
流路中为高压力工作状态,
通常使用耐高压的六通阀进样装置,
其结构如图所示:
(4) 高效分离柱
柱体为直型不锈钢管,内径1~6 mm,柱长5~40 cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。
(5) 高效液相色谱检测器
紫外光度检测器(UV):最小检测量10-9g·mL-1,对流量和温度的波动不敏感,可用于梯度洗脱。
最常用的检测器。
光电二极管阵列检测器
光电二极管阵列检测器:1024个二极管阵列,各检测特定波长,计算机快速处理,三维立体谱图,如图所示。
三、影响分离的因素
在高效液相色谱中, 速率方程中的分子扩散项B/U较小,可以忽略不计,而只有两项,即:
H = A + C u
故液相色谱H-u曲线与气相色谱的形状不同,如图所示:
影响分离的主要因素有流动相的流量、性质和极性。
1. 影响分离的因素——流速
cm/s时, H~u曲线是一段斜率不大的直线。降低流速,柱效提高不是很大。但在实际操作中,流量仍是一个调整分离度和出峰时间的重要可选择参数。
2. 固定相及分离柱
气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱,其选用原则与气相色谱一样。
选择合适的固定相,降低填料粒度可显著提高柱效,但在高效液相