文档介绍：生物化学实验1-糖类的性质实验
考核方式
实验操作占35%，实验报告占60%，考勤占5%
操作分主要根据预录，结合课堂表现评分
实验一糖类的性质实验
实验目的：
了解某些糖类颜色反应的生物化学实验1-糖类的性质实验
考核方式
实验操作占35%，实验报告占60%，考勤占5%
操作分主要根据预录，结合课堂表现评分
实验一糖类的性质实验
实验目的：
了解某些糖类颜色反应的原理
学习用糖的颜色反应鉴别糖类的方法
通过实验手段了解糖的基本性质及还原糖的鉴定方法
为后续课程中有关糖类的知识的学习打下基础；为后续设计行、研究性实验提供定性检测的方法与手段
实验一糖的性质实验
Molish（紫环）反应原理
糖在浓无机酸作用下脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者与α-萘酚生成紫红色物质。
该反应不是糖类的特异性反应（丙酮、甲酸、乳酸、草酸和葡萄糖醛酸）
％，％。
Molish反应
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Molish反应操作注意事项
添加Molish试剂时切记充分摇匀
加浓硫酸时用移液管沿管壁缓慢加入，切勿摇动
注意观察各管紫色环出现时间的先后、环的宽度、颜色的深浅，并做好记录。
Molish反应
操作方法
在试管中加入1 mL 样品水溶液，滴入4滴10%的α-萘酚乙醇溶液，混合均匀后将试管倾斜约45度，沿管壁慢慢加入1 mL浓硫酸(勿摇动)。此时样品在上层，硫酸在下层、若在两层交界处出现紫色的环，表明样品中含有糖类化合物。
-萘酚反应(Molisch Test)
Seliwanoff（谢里瓦诺夫）反应（间苯二酚反应）
酮糖脱水生成羟甲基糠醛，后者与间苯二酚作用生成红色物质
醛糖在同样条件下反应缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时才呈微弱的阳性反应
Seliwanoff反应
Seliwanoff反应操作要点
注意试剂添加量：，塞氏试剂1-2ml混匀，同时放入沸水浴
注意观察各管颜色变化的时间及颜色的变化过程，并做好记录
塞氏试剂：
溶解50mg间苯二酚（resorcinol）于100mL盐酸（盐酸：水=1:2v/v）中
Seliwanoff反应
操作方法
在试管中加入5滴2% (1滴5%)的样品溶液，再加人10滴(1 mL)间苯二酚盐酸试剂，在沸水浴中加热，记录溶液转变为红色所需要的时间。若溶液在1～2分钟内变为红色，说明样品为酮糖。否则为醛糖。
还原糖的鉴定原理
糖类分子中的还原性基团在碱性条件下将Cu2+还原成Cu+，生成Cu2O沉淀。
沉淀颜色与沉淀颗粒大小有关，沉淀颗粒大小与反应速度有关：速度慢颗粒大颜色偏红，速度快颗粒小颜色偏黄。
反应速度取决于糖的浓度和还原性的强弱
还原糖的鉴定
还原糖鉴定实验操作要点
实验前鉴定试剂有效性：试剂与水1：4，加热煮沸无沉淀方可使用。
先加鉴定试剂后加糖
从沸水浴（2-3min）中同时取出后观察试管中的变化
注意Benedict试剂与Fehling试剂在反应时间和沉淀生成量等方面的区别。
还原糖的鉴定
操作方法
取Fehling试剂A,，再加入4滴1%的样品溶液，在沸水浴中加热2～3分钟，若有红色或黄绿色沉淀生成，表明样品为还原性糖。
Fehling试剂A,B：
试剂A：。试剂B：称取17g五结晶水酒石酸钾钠溶于20mL热水中，然后加入20mL含5g NaOH 水溶液，稀释到100mL
Benedic试剂：
400mL水中加85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠； ②。制成CuSO4溶液； ③把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠溶液-Na2CO3中，边加边搅，如产生沉淀可滤去。
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