文档介绍：HP1100液相色谱使用说明
一、分析方法编辑和存储
1、在使用液相色谱之前首先要打开电源开关,然后在依次打开液相色谱仪器上的电源开关(按由上到下顺序)、计算机,在桌面、双击“Instrument 1 Online”图标,打开液相色谱工作站使用软件。
2、进入工作站“Instrument 1 (online): Method & Run Control”,单击“File”菜单,单击Load“Method…”。
3、单击“Method…”按钮之后,会出现“Load Method: Instrument 1”对话框。一般选取如图所选的方法,点“OK”。
4、选定方法后,点“OK”。单击“Method”,单击“Edit entire Method…”。
5、出现对话框后,不用改直接点“OK”。
6、在此可对选定的方法用英文进行描述。点“OK”。
7、出现如下对话框,需要对流速、停止采集数据时间、限压、流动相名称及配比进行设定,如果是梯度淋洗可点设置时间比例、流速或压力,(注:此为《儿茶素类化合物的分离与定量分析》的条件)设定完成后,点“OK”。

8、设定DAD检测器的波长,可以根据需要选择5个不同的波长,得到5个波长下的色谱图,对于未知条件选择特别适用,选好后,点“OK”。
9、出现对话框,给出选定信号的详细统计,不用改直接点“OK”。
10、积分参数的设定,也可在以后改动,点“OK”。
11、按如下对报告的结果进行设定,点“OK”。
12、下面出现的选项可随色谱分析采集记录流动相、流速、压力、温度的波动曲线,一般不用选,点“OK”。如有要求可根据需要选取。
13、对定量表进行设定。一般仍选默认值,点“OK”。
14、设定定量组分,继续点“OK”。
15、出现对话框,仍选默认设定。点“OK”。
16、至此,所有的设定都结束。
17、点击“View”菜单,按照下图点击“System Diagram…”,
18、逆时针打开排气阀,鼠标点击流量压力处,点将流量(Flow)设为3,水设为100%,点“OK”。

19、再点“Control…”,打开泵的控制开关。选定“On”后,点“OK”,泵开始工作。水的气泡排好后,点其它的流动相分别设为100%进行排气处理。
都排好以后点将流量(Flow)-,按实验条件设定流动相(Solvents)配比,例如选C:中液体的比例,只需要调整C:后面的上下箭头即可,设置完毕点“OK”。运行5分钟后,将排气阀关闭。
20、待泵运行稳定后(约5分钟),左键点击下图位置,再点“Control…”,打开检测器氘灯的控制开关。
21、如果只检测紫外范围,紫外灯选定为“On”,点“OK”。
22、按下图设置文件名。可以修改操作者姓名。
23、设置完成后,单击文件,另存为,自己命名的方法。

24、待基线平稳后,即可对样品进行分析,记录每次进样的样品文件名。
二、外标分析法——建立校正表
1、样品采集后,要在2 Data Analysis中进行数据处理,建立校正曲线。
2、单击图标打开标准样品1#溶液的文件名。
3、在Data Analysis状态下,单击Integration菜单,选择Integration Event …选项,编辑积分参数
,进行必要的组分积分。如果不需要处理,可直接进入第5步建立新的校正表。

4、有改动时,需要单击下图第一个图标,保存积分方法

5、单击Calibration建立新的校正表。
6、单击设置单位。
在化合物处键入名称,加入计算出的标准样品1#浓度。点“OK”。
7、调出2#样品的色谱图,按下图加一级
8、加入计算出的标准样品2#浓度。点“OK”。
9、以此类推,一直把配制测定的标准溶液都加入,点“OK”。
10、单击校正表。出现标准曲线。查看相关系数,〉,否则可重新配置标准溶液。
11、调出待测样品谱图,设定报告
12、单击report报告,print report 打印报告。
13、检查无误,单击print打印出报告,计算药片中有效药物成分。
色谱法作为一种分离方法,是利用物质在两相中吸附或分配系数的微小差异达到分离的目的,具有高效、快速、灵敏的特点,与气相色谱相比,液相色谱的最大特点是可以分离不可挥发而具有一定溶解性的物质或受热后不稳定的物质,而这类物质在已知化合物中占有相当大的比例。