文档介绍：微生物实验-细菌培养、接种
半固体培养基
斜面培养基
细菌培养接种法--斜面接种、液体接种、半固体
菌种：大肠杆菌或葡萄球菌斜面
材料：斜面、液体、半固体培养基
用具：接种环、接种针
液体培养基微生物实验-细菌培养、接种
半固体培养基
斜面培养基
细菌培养接种法--斜面接种、液体接种、半固体
菌种：大肠杆菌或葡萄球菌斜面
材料：斜面、液体、半固体培养基
用具：接种环、接种针
液体培养基
结果观察——普通平板
普通琼脂平板培养基上，大肠埃希菌形成菌苔和菌落生长现象。
注意：大小、颜色、透明度、凸起度、表面干燥或湿润、光滑或粗糙、边缘是否整齐及血平板上的溶血情况。
结果观察——液体培养基
结果观察——斜面培养基
琼脂斜面培养基上大肠埃希菌形成的菌苔生长现象
菌苔（mossy）
指细菌生长繁殖后，在培养基表面形成的一层培养物
结果观察——半固体培养基
1、扩散生长：具有动力的细菌,可见培养物扩散和培养基变混浊。
即有鞭毛的细菌：由穿刺线向外扩散生长（羽毛状或云雾状）
2、原位生长：没有动力的细菌，可见培养物没有扩散，培养基仍然澄清。
即无鞭毛的细菌：沿穿刺线生长
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细菌代谢产物观察
细菌的酶不一样，对营养物质的分解能力不一样，
产生的代谢产物也不一样。
常见：
糖发酵试验
吲哚（indol）试验
***红（methyl red）实验
VP（Voges-Proskauer）试验
枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验
尿素酶试验
硫化氢试验
糖发酵试验
不同细菌分解糖类的能力和代谢产物不同。
***红（methyl red）实验
M - ***红（methyl red）实验
葡萄糖→***酸→乙酰***甲醇 ***红 -
葡萄糖→***酸 ***红 +
吲哚（indol）试验
I-吲哚（indol）试验
色氨酸→吲哚→玫瑰吲哚
↑
对二***氨基苯甲醛
枸橼酸盐利用试验
C -枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验
利用枸橼酸盐生长 +
不能利用 -
硫化氢试验
硫化氢试验（醋酸铅培养基）
某些细菌分解含硫氨基酸，生成H2S，H2S遇铁盐（如硫化亚铁、醋酸铅等），则形成黑褐色硫化铁（铅）沉淀物，而呈黑色为（＋）。
尿素酶试验
产生氨使培养基变碱，指示剂显红色，为阳性。如：变形杆菌为阳性。
IMViC试验
I - 吲哚（indol）试验
M - ***红（methyl red）试验
V - VP（Voges-Proskauer）试验
C -枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验
IMViC试验
I M Vi C试验
大肠埃希菌 + + - -
产气杆菌 - - + +
IMViC试验：
是吲哚、***红、V-P以及枸橼酸盐利用试验四者的合称。常用于肠道杆菌的鉴定。
实验小结
1、三类培养基
液体培养基——用于增菌；
均匀混浊、沉淀、表面生长
半固体培养基——观察动力；保存菌种（6个
月）；穿刺线，扩散生长
固体培养基——分离纯化；保存菌种（1个月）
菌落、菌苔
2、IMViC试验
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