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毛细血管特意性抗体.doc

上传人:miaoshen1985 2022/4/17 文件大小:25 KB

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文档介绍

文档介绍:我想做猪心肌毛细血管密度测定,用VIII因子作为评价指标,
请各位高手指点找不到猪的VIII因子抗体情况下,用哪种动物的抗体代替比较好
APP(氨基肽酶P),FLT1(血管内皮生长因子受体1)
cd31、cd34 、还有因子八,但lade小体,以及放免功能分析!试剂公司有以下几个:中山/杉、博士德、罗氏、santru、chemokon等公司。
应该有吧,我们这作人的免疫比较多。
国内常用的是中杉和迈新公司的,这两家公司是分装国外抗体,做过实验后销售的。搏士德公司是用相关因子直接免疫人、鼠或其他动物,抗体比较全,但稳定性一般。
如果有条件可以买国外抗体,价格比较贵,一般在3000元左右,中杉代理santa cruz公司,迈新代理labvision(neomarker)公司产品,产品抵运速度较快,此外,国外还有R&D,chemicon,novus,等试剂大公司。
兔的抗体较少,自己打电话问一下吧。
血管内皮细胞八因子相关抗原鉴定的过程
,!(具休步骤)谢谢!
将细胞接种到明胶包被的盖玻片上,24小时后取出,用PBS洗涤后,放入4%***固定10min,室温干燥后,于3%过氧化氢中室温孵育10min(除内源性过氧化物酶),蒸馏水冲洗,PBS浸泡5min,以正常山羊血清工作液封闭,室温孵育15min,倾去血清(勿洗),滴加1:50八因子兔抗人(对照加PBS),37度孵育1hr,后用PBS洗,滴加生物素标记二抗(羊抗兔),室温孵育15min,用PBS洗,滴加辣根素标记的链霉素卵白素工作液,室温孵育15min,用PBS洗,加DAB,室温显色10min。自来水充分冲洗后,乙醇梯度脱水封片。显微镜观察并照相
如果二抗用荧光标记的,会更简单一些,图片会更漂亮,并且假阳性少一些,有时Webel-Palade body都可以显示出来
野原 你好
我看到你在 2005-05-06 贴子说 “关于血管内皮细胞的检测抗体,目前有许多更新的取代了以往的CD34、CD31、VIII因子。多查查文献有好处。” 我想做移植胰岛周围新生血管的观察,您能给一些指点吗 ,有哪些新因子,及检测方法? 谢谢!
1 标记内皮细胞常用的有CD31、CD34、八因子相关抗原等,CD31、CD34的敏感性较好,
CD31主要表达于血小板、单核细胞、粒细胞、B淋巴细胞和内皮细胞;CD34表达于早期的淋巴造血干细胞、祖细胞、血管内皮细胞、胎纤维母细胞和某些神经组织的细胞。八因子相关抗原存在于人的血管内皮细胞、巨细胞和血小板,因此特异相对较好。建议还是选择八因子相关抗原做肿瘤微血管密度的计数较好;
2 试剂公司国内的大部分都是分装和销售公司,试剂都是由国外公司生产的,而国外公司的产品一般来说质量还是很好的,所以,无论从哪家公司购买抗体,建议最好买原装试剂,但是价格较高,所以可以买国内分装的浓缩试剂,最好不要买所谓的工作液,很不稳定且价格高。
SD乳鼠培养肺微血管内皮细胞,培养已经成功,请问该如何鉴定我养的细胞是微血管内皮细