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实验六叶绿素的提取、分离.docx

上传人:wenjiaosuoa 2022/4/20 文件大小:41 KB

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实验六叶绿素的提取、分离.docx

文档介绍

文档介绍:叶绿素的提取、别离
、实验目的
掌握从植物叶中提取叶绿素的方法.
了解纸层层析的原理,掌握纸层析的一般操作和定性鉴定方法.
二、实验原理
叶绿素提取原理:叶绿素等是脂溶性的有机分子,根据相似相溶的原理,叶绿体 中含有叶绿体色素(叶叶绿素的提取、别离
、实验目的
掌握从植物叶中提取叶绿素的方法.
了解纸层层析的原理,掌握纸层析的一般操作和定性鉴定方法.
二、实验原理
叶绿素提取原理:叶绿素等是脂溶性的有机分子,根据相似相溶的原理,叶绿体 中含有叶绿体色素(叶绿素 a和b、胡萝卜素及叶黄素)等色素分子溶于有机溶剂而不溶 ***或乙醇等有机溶剂提取而不用水.
色素别离的原理:纸层析是用滤纸作为了载体的一种色层分析法,其原理主要是 利用混合物中各组分在;流动相和固定相的安排比(溶解度) 上吸附的水为了固定相(滤纸纤维常能吸 20%左右的水),有机溶剂如乙醇等为了流动相,
,当流动相溶齐U在滤纸的毛 细管的作用下,连续不断地沿着滤纸前进通过滤液细线时,试样中各组份便随着流动相 溶剂向前移动, 大的物质移动速度较快,移动距离较远;安排比拟小的物质移动较慢,移动距离较近, 试样中各组分分别聚集在滤纸的不同的位置上,从而到达别离的目的.
毛细管点样
薄层色谱展开
三、仪器和药品
研钵、毛细管、漏斗、纱布、小烧杯、试管、培养皿等
95%酒精、***、石油酰
碳酸钙,石英砂 四、实验步骤
取菠菜或其他植物新鲜叶片 20g左右,洗净,用滤纸擦干,去掉叶柄和中脉
剪碎,放入研钵.
加4-5ml无水乙醇,研磨至糊状, 再加10ml
15-20分钟后,过滤入50ml锥形瓶中加塞
15cm),将其剪成滤纸条( 15cn^ 2cm),将
研钵中参加少量碳酸钙和石英砂, 无水乙醇充分混匀以提取叶片匀浆中的色素, 待用.
别离:(1)取圆形定性滤纸一张(直径
其2cm 一端剪去两侧,中间留一长约 ,,并在滤纸剪口上方用
铅笔画一条直线,作为了画滤液细线的基准线(注意:滤液线必须距底边 1-).用
毛细管吸取乙醇叶绿体色素提取液,沿纸条的滤液线涂,等风干后,再重复操作数 2-3
次.(用滤液涂圆点状类似)
(2)在层析缸中参加适量(约 2ml)的***作为了推动剂,将滤纸条带有色素的一
端轻轻插入层析缸中, 使滤纸条下端浸入推动剂中. 迅速盖好层析缸盖, 静置40-60min.
此时,推动剂借毛细管引力顺滤纸条向上扩散,并把叶绿体色素向上推动,不久即可看 到各种色素的条带.
当推动剂前沿接近滤纸边