文档介绍：第十三章程序性细胞死亡与细胞衰老
第一节程序性细胞死亡
一、动物细胞的程序性死亡
程序性细胞死亡(PCD)指在生长发育过程中细胞在基因调控下,按照一定时空顺序发生的生理性死亡。
细胞凋亡是形态学的概念,程序性细胞死亡是功能上的概念。
细胞死亡有三种形式:凋亡、坏死和自噬
细胞凋亡(apoptosis): apoptosis为希腊语,原指秋天时树叶自然凋零。由体内外因素触发细胞内预存的死亡程序而导致的细胞死亡过程称为细胞凋亡(又称为程序性细胞死亡)。
(一) 细胞凋亡
1).形态学特征

2).生化特征
1. 细胞凋亡的特征
→染色质边集
→固缩
→出芽
脱接触→
→凋亡小体
2、细胞凋亡的意义
1)生理意义
①确保正常发育、生长:清除多余的、失去功能价值的细胞(指趾间组织细胞;动物变态;神经元细胞;皮肤角质形成)
②维持内环境稳定:清除受损突变细胞, DNA损伤的细胞,衰老细胞
③发挥积极的防御功能:感染病毒细胞凋亡,阻止病毒复制
2)病理学意义
病原体侵染
诱导凋亡——HIV
抑制凋亡——Poxvirus
①细胞凋亡不足
肿瘤,自身免疫疾病;
②细胞凋亡过度
神经退行性疾病(AD,帕金森症)、心肌梗塞、再生障碍性贫血、骨组织坏死。
3、细胞凋亡的检测方法
①. 形态学,电镜,光镜-染色法;
台盼蓝 DAPI
②. DNA凝胶电泳——ladder;
③.线粒体的分析:膜电位——常用的染料JC-1
④. TUNEL技术:脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)将生物素或荧光标记的dUTP加在DNA断裂口的3’末端
二乙酸荧光素(FDA),绿色荧光,活细胞染色。
Hoechst 33342或33258,DAPI,吖啶橙(AO),半通透,凋亡和固定后的细胞荧光较强。
溴化乙啶(EB)、碘化丙啶(PI)、放线菌素D(7-AAD),不通透,正常和凋亡细胞拒染。
可用不同性质的染料对凋亡细胞进行双染色。
常用检测细胞凋亡的染料:
Human embryo at day 4 morula containing 23 nuclei labelled with DAPI (blue), including seven TUNEL-labelled condensed nuclei (pink, arrow) that were excluded from development (Kate Hardy 1999).