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试验二培养基的配制与灭菌2.ppt

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试验二培养基的配制与灭菌2.ppt

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试验二培养基的配制与灭菌2.ppt

文档介绍

文档介绍:试验二培养基的配制与灭菌2
3、马丁氏培养基
主要是真菌生长所需要的碳源、氮源、无机盐、维生素等成分,均来自天然成分,也有化学成分。马丁氏是一种用来培养霉菌的培养基。
4、 YPD培养基
YPD 或YPED,又叫酵母试验二培养基的配制与灭菌2
3、马丁氏培养基
主要是真菌生长所需要的碳源、氮源、无机盐、维生素等成分,均来自天然成分,也有化学成分。马丁氏是一种用来培养霉菌的培养基。
4、 YPD培养基
YPD 或YPED,又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基,加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖(YPD)琼脂培养基。主要用于酵母菌的培养。
(二)实验方法
计算 → 称量 → 熔化 →
调pH (过滤) →分装
→灭菌
l、配制牛肉膏蛋白胨培养基
牛肉膏
蛋白陈
NaCl
自来水 1000毫升
琼脂 16-18克(固体)
pH —
灭菌 121℃, 20-30分钟
2. 高氏I号培养基
可溶性淀粉 20. 克
KNO3 1克
K2HPO4
MgSO4﹒7H20
NaCl
FeSO4
蒸馏水 1000毫升
琼脂 16-18克(固体)
先用少量蒸馏水将淀粉溶化,然后再加盐类。—。
3、马丁氏培养基
KH2PO4 1克
MgSO4﹒7H20
蛋白陈 5克
葡萄糖 10克
琼脂 16-18克(固体)
pH值自然,培养液1000ml加1%.
4、 YPD培养基
配方:
酵母膏 1%
蛋白胨 2%
葡萄糖) 2%
琼脂粉 16-2%
pH值自然
实验二、培养基的灭菌
目的要求  

2、掌握高压蒸汽灭菌的操作方法。
3、了解干热灭菌的原理和应用,掌握干热灭菌的操作技术。
4、了解紫外线灭菌的原理和方法
高压蒸汽灭菌
高压蒸汽灭菌锅是一个耐高压又密闭的金属锅。它是利用在密闭条件下产生高压蒸汽来达到灭菌的效果。其温度在100oC以上,有强大的杀菌能力。因此它是一种用途广泛,效率高的灭菌工具。
分类:1、卧式 2、立式
具体操作步骤:
(1)加入适量自来水于灭菌锅中(至水位线)
(2)摆入上述包装好的待灭菌的培养基,注意:不要摆得太挤,以免影响蒸汽流通和灭菌效果
(3)加盖旋紧螺旋,使蒸汽锅密闭不漏气(对角线均匀拧旋)
(4)打开放气阀,打开电源,自开始产生蒸汽后10分钟(此时蒸汽锅内的冷空气由排气阀排尽)关紧放气阀,让温度随蒸汽压力上升而上升,当达所需压力时(15磅/时2)控制热源维持所需时间(20分钟)然后停止加热,让其自然冷却。
(5)待压力降至0磅时,打开排气阀,再打开锅盖,取出灭菌物。
注意:压力未降至0磅时,切勿打开锅盖,否则突然降压,招致培养基沸腾,沾湿棉塞,甚至冲出管外。
(6)自锅中取出灭菌好的培养基,放置稍冷却后摆成斜面,而后至37oC恒温箱培养24小时,无菌生长,方可保存备用。
应用此法灭菌是否彻底的一个重要关键是在压力上升之前,必须将锅内的冷空气完全排尽,否则虽然压力表已指15磅/时,但锅内的温度还只有100oC,结果往往造成灭菌不彻底。
斜面摆放示意图:
干热灭菌
干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关,在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白质凝固就越快,反之含水量越小,凝固缓慢。
紫外线灭菌
是用紫外线灯进行杀菌。紫外线杀菌机制主要是它诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成和DNA链