文档介绍：生物技术实践
实验
要求
5-1  微生物的利用
(1)微生物的分离和培养
(2)培养基对微生物的选择利用
(3)利用微生物发酵来生产特定的产物
掌握程度参考本考试大纲中的:
一、考试的能力要求
2、实验与探究能力
5-2  生物技术在食品加工及其他方面的应用
(1)从生物材料中提取某些特定的成分
(2)运用发酵加工食品的基本方法
(3)植物的组织培养
掌握程度参考本考试大纲中的:
一、考试的能力要求
2、实验与探究能力
(2)按培养基的物理形态分:
液体培养基
半固体培养基
固体培养基
一培养基:
(3)按培养基的功能分:
基础培养基
选择培养基
鉴别培养基
(1)按培养基的化学成分分:
·天然培养基
·合成培养基
·半合成培养基
选择培养基
加入青霉素的培养基:
分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基:
分离金黄色葡萄球菌
不加氮源的无氮培养基:
分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基:
分离自养型微生物
加入青霉素等抗生素的培养基:
分离导入了目的基因的受体细胞
加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基:
分离杂交瘤细胞
各种培养基的具体配方不同,但一般都包括哪些成分?

不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐等营养物质。
注: 另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
(1)无菌技术具体操作
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
二无菌技术:无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min
2、巴氏消毒法:70-75 ℃下煮30min或 80 ℃下煮15min
3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源
4、紫外线消毒
……
(2)常用消毒的方法:
1、灼烧灭菌:
2、干热灭菌:160-170 ℃下加热1-2h。
3、高压蒸气灭菌:100kPa、121 ℃下维持15-30min.
(3)常用灭菌的方法:
条件
结果
常用的方法
消毒
较为温和的物理或化学方法
仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)
煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法
灭菌
强烈的理化因素
杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子
灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌