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斑马鱼3种胰蛋白酶原基因的克隆_序列分析及组织表达.pdf

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文档介绍

文档介绍:第 52 卷第 1 期中山大学学报自然科学版 Vol. 52 No. 1
2013 年 1 月 ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI Jan. 2013
斑马鱼 3 种胰蛋白酶原基因的克隆、
序列分析及组织表达*
陈文波,李卫国,张珍,焦春磊,吴帆
河南理工大学资源环境学院,河南焦作 454000
,
摘要胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶类超家族成员之一在动物蛋白消化中起着重要作用。为深入研究胰蛋白酶
, ,
在鱼类中的蛋白结构和生理功能利用 RT-PCR 和 RACE 方法成功获得了斑马鱼 3 种胰蛋白酶原 cDNA 序列
, ,
zftry1a、zftry1b 和 zftry2 。结果表明 zftry1a 和 zftry1b 均有 242 个氨基酸残基组成其中包括 15 个氨基酸的信
,
号肽和 5 个氨基酸 LDDDK 的激活肽。zftry2 由 247 个氨基酸残基组成其中包括 15 个氨基酸的信号肽和 9
, ,
个氨基酸 APLGDDDDK 的激活肽。氨基酸序列比对结果显示三者具备胰蛋白酶原的保守结构特征如含有
, ,
催化三联体氨基酸 His-57、Asp-102 和 Ser-195 12 个半胱氨酸位于底物结合口袋底部 Asp-189 和口袋开口
, ,
处的 Gly-216、Gly-226 等。进化树结果显示斑马鱼 zftry1a 和 zftry1b 属于 group I 为阴离子胰蛋白酶原斑马
, , ,
鱼 zftry2 属于 group II 为阳离子型胰蛋白酶原。RT-PCR 结果显示三者组织分布模式类似且在肠中有最高表
达量。这些结果为研究鱼类胰蛋白酶原的基因进化和功能以及进一步探讨鱼类消化生理的分子机制奠定了基础。
关键词斑马鱼胰蛋白酶原克隆组织表达

中图分类号 Q785 S917 文献标志码 A 文章编号 0529 - 6579 2013 01 - 0111 - 07
,
Molecular Cloning Sequence Analysis and Tissue Expression of
,
Three Forms Trypsinogens in Zebrafish Danio rerio
, , , ,
CHEN Wenbo LI Weiguo ZHANG Zhen JIAO Chunlei WU Fan
, , ,
School of Resource and Environment Henan Polytechnic University Jiaozuo 454000 China
, ,
Abstract Trypsin one member of the serine protease family plays important roles in animal protein di-
,
gestion. It is synthesized and secreted as proenzyme trypsinogen and removed the N-terminal activation
p